[發(fā)明專利]一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙及檢測方法

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• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111337669A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王國華;葉莉莎;蘇飛;駱倩倩;姜正林;李霞;徐麗華
• 申請（專利權(quán)）人: 南通大學(xué);江蘇斯微特醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 錢超

本發(fā)明公開了一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙及檢測方法，快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙由樣品墊、膠金墊、反應(yīng)顯色區(qū)、吸水區(qū)和支撐板組成，樣品墊和吸水墊分別設(shè)置于支撐板上且位于支撐板上相對的兩側(cè)，樣品墊為吸濾紙或玻璃纖維膜，用于承載待檢測物；支撐板上固定有硝酸纖維膜，吸水墊為吸水紙；通過雙結(jié)合新型冠狀病毒抗體和病毒的受體ACE2蛋白，采用雙酶聯(lián)免疫吸附來特異性捕捉結(jié)合冠狀病毒蛋白抗原；再通過試紙反應(yīng)顯色區(qū)中ACE2抗體與生物素聯(lián)合，親和素連接辣根過氧化物酶，經(jīng)過生物素?親和素系統(tǒng)，通過化學(xué)顯色可快速判斷也可以利用酶標(biāo)儀精準(zhǔn)檢測病毒含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及新型冠狀病毒抗原快速檢測試劑技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙及檢測方法，可檢測人全血、血清、血漿、唾液、咽拭子、糞便、尿液等樣本。

背景技術(shù)

由于有限的物資和檢測手段，目前已知確診新型冠狀病毒需要用qPCR方法，其操作難度較大以及相較于其他檢測方法成本較高。這就導(dǎo)致現(xiàn)有試紙的數(shù)量并不能滿足大量市民的統(tǒng)一檢測，目前新型冠狀病毒的疑似病例居高不下，因此，早期并且快速的確診病毒感染是當(dāng)務(wù)之急，發(fā)明一種檢測新型冠狀病毒試紙以改善目前早期確診病毒感染具有重要臨床價(jià)值。

通過雙結(jié)合新型冠狀病毒（2019-nCoV）IgM及IgG抗體和病毒的受體ACE2蛋白，采用“雙酶聯(lián)免疫吸附”來特異性捕捉結(jié)合冠狀病毒蛋白抗原；再通過試紙反應(yīng)顯色區(qū)中ACE2抗體與生物素聯(lián)合，親和素連接辣根過氧化物酶，經(jīng)過生物素-親和素系統(tǒng)，通過化學(xué)顯色，可快速判斷檢測結(jié)果，也可以利用酶標(biāo)儀精準(zhǔn)檢測病毒含量。雙結(jié)合病毒抗體和病毒的受體ACE2蛋白，使其特異性結(jié)合新型冠狀病毒，并通過顯色條帶來觀察陽性陰性結(jié)果，同時(shí)可提取蛋白做定量分析，為本專利的創(chuàng)新點(diǎn)。對比現(xiàn)有公司的產(chǎn)品，其技術(shù)只能是檢測人全血、血清、血漿等樣本中的新型冠狀病毒（2019-nCoV）抗原，而我們的技術(shù)采用“雙酶聯(lián)免疫吸附”來特異性捕捉結(jié)合唾液、咽拭子、糞便等樣本，而且甚至可以捕捉密閉環(huán)境中游離空氣中的病毒，為我們產(chǎn)品的另一優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙及檢測方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的操作難度較大以及相較于其他檢測方法成本較高等問題；本檢測方法通過獲取常見的ACE2蛋白和新型冠狀病毒抗體IgM和IgG，通過“雙酶聯(lián)免疫吸附測定”來檢測新型冠狀病毒，本產(chǎn)品使用了可以與冠狀病毒特異性反應(yīng)的抗體和受體蛋白，受體蛋白固定在硝酸纖維素膜上，另一種抗體與膠體金結(jié)合，如果待檢樣本中存在新型冠狀病毒CV，CV抗原首先與抗CV抗體膠體金結(jié)合物反應(yīng)，通過毛細(xì)管現(xiàn)象在膜上移動，最終于與固定在NC膜上的受體蛋白結(jié)合，形成ACE2蛋白-新冠狀病毒-新冠狀病毒抗體IgM，IgG結(jié)合物，通過結(jié)合ACE2抗體生物素和親和素辣根過氧化物酶，進(jìn)而激活發(fā)色過氧化物和供氫體而呈現(xiàn)顏色變化，該結(jié)合產(chǎn)物與底物及酶的顯色液發(fā)生反應(yīng)，通過條帶來判斷病毒的感染情況，對比現(xiàn)有公司的產(chǎn)品，他們的技術(shù)只能是檢測人全血、血清、血漿等樣本中的新型冠狀病毒2019-nCoV抗原，而我們采用的“雙酶聯(lián)免疫吸附”可以特異性捕捉結(jié)合唾液、咽拭子、糞便等樣本，而且甚至游離空氣中的病毒；用最簡單的試紙顏色就能呈現(xiàn)，無需儀器設(shè)備，簡單快速，適合現(xiàn)場篩查；降低個(gè)體在醫(yī)院感染的風(fēng)險(xiǎn)；縮短病人等待時(shí)間，及時(shí)進(jìn)行治療；減輕疫情定點(diǎn)醫(yī)院的工作量。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，由樣品墊、膠金墊、反應(yīng)顯色區(qū)、吸水墊和支撐板組成，所述樣品墊、膠金墊、反應(yīng)顯色區(qū)和吸水墊由左至右依次設(shè)在支撐板上，所述樣品墊和吸水墊分別設(shè)置于支撐板上相對的兩側(cè)；所述樣品墊的右側(cè)為膠金墊，有0.5cm的銜接重疊區(qū)域；膠金墊右側(cè)緊鄰為反應(yīng)顯色區(qū)，前者覆蓋后者鄰邊0.5cm，吸水墊位于反應(yīng)顯色區(qū)的右側(cè)，且覆蓋反應(yīng)顯色區(qū)0.5cm，樣品墊用于承載待檢測物；樣品墊為吸濾紙或玻璃纖維膜；吸水墊為吸水紙；膠金墊上附有新型冠狀病毒的IgM抗體及IgG抗體。