[發明專利]一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙及檢測方法

在審

• 申請號: 202010139385.5
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111337669A
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 王國華;葉莉莎;蘇飛;駱倩倩;姜正林;李霞;徐麗華
• 申請（專利權）人: 南通大學;江蘇斯微特醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 錢超

1.一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：所述快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙由樣品墊（1）、膠金墊（2）、反應顯色區（3）、吸水墊（4）和支撐板（5）組成，所述樣品墊（1）、膠金墊（2）、反應顯色區（3）和吸水墊（4）由左至右依次設在支撐板（5）上，所述樣品墊（1）和吸水墊（4）分別設置于支撐板（5）上相對的兩側；所述樣品墊（1）的右側為膠金墊（2），有0.5cm的銜接重疊區域；膠金墊（2）右側緊鄰為反應顯色區（3），前者覆蓋后者鄰邊0.5cm，吸水墊（4）位于反應顯色區（3）的右側，且覆蓋反應顯色區0.5cm，樣品墊（1）用于承載待檢測物；樣品墊（1）為吸濾紙或玻璃纖維膜；吸水墊（4）為吸水紙；膠金墊（2）上附有新型冠狀病毒的IgM抗體及IgG抗體。

2.根據權利要求1所述的一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：所述反應顯色區（3）由NC膜、質控線C和檢測線T組成，所述質控線C和檢測線T分別設在NC膜表面上。

3.根據權利要求2所述的一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：所述顯色區（3）上質控線C和檢測線T間隔2-4 cm。

4.根據權利要求2所述的一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：所述反應顯色區（3）的NC膜由酶的顯色液、與生物素相連的病毒受體ACE2蛋白、底物、與親和素相連的辣根過氧化物酶HRP構成，所述酶的顯色液為TMB顯色液或DAB辣根過氧化物酶顯色液，所述底物為可發色的過氧化物和供氫體組成，所述ACE2蛋白和新型冠狀病毒IgM及IgG抗體的用量比1:2-1:3；酶的顯色液、與生物素相連的病毒受體ACE2蛋白、底物、與親和素相連的辣根過氧化物酶HRP的摩爾比為3:1:2:2；底物中的可發色的過氧化物和供氫體摩爾比為1:1，所述檢測線T和質控線C上分別固定有兩種不同的抗體，分別識別不同的抗原決定簇，其中檢測線T抗體ACE2蛋白識別待測抗原，質控線C上的抗體抗-IgM和抗IgG識別膠金墊（2）上偶聯的IgM及IgG抗體，膠金墊（2）表面分布有膠體金顆粒，膠體金為一種顯色標記物，同時與IgM抗體和IgG偶聯，檢測線T和質控線C顯示出的紅色條帶就是膠體金大量聚集的結果。

5.根據權利要求1所述的一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：所述支撐板（5）為不吸水材料，如PVC或其它硬質材料，支撐板（5）上固定有硝酸纖維膜。

6.根據權利要求4所述的一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：若待檢樣本中存在新型冠狀病毒，新型冠狀病毒抗原首先與膠金墊（2）上的金標抗體IgM抗體及IgG抗體反應，形成抗原抗體復合物，通過毛細管現象在NC膜上移動，繼續往吸水墊（4）方向流動，最終與固定在NC膜上的ACE2蛋白結合，在檢測線T上，有針對抗原的抗體即ACE2蛋白，這個抗體識別的抗原表位和金標抗體是不一樣的，所以同一個抗原能夠同時被這兩種抗體所識別，這時候金標抗體就會在檢測線處被截留一部分，形成ACE2蛋白-新冠狀病毒-新冠狀病毒抗體IgM，IgG結合物，再結合ACE2抗體生物素和親和素辣根過氧化物酶，進而激活發色過氧化物和供氫體而呈現顏色變化，這樣就在檢測線T上顯色了，金標抗體的量肯定是富余的，所以不會只在檢測線T處被截留，還會繼續往吸水墊方向流動，這時候就有一條質控線C，質控線C上面有的是專門針對金標抗體的抗體抗-IgM和抗-IgG，因為質控線C識別金標抗體的能力是非常強的，所以這條線就一定會顯色，如果這條線沒有顯色，那么這次檢測結果是無效的，因此可通過條帶來判斷病毒的感染情況；而若待檢測物中不含有新型冠狀病毒，則不形成結合物。

7.根據權利要求1所述的一種快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙，其特征在于：所述快速檢測新型冠狀病毒檢測試紙本體為方形。