[發(fā)明專利]一種均相法肌紅蛋白化學(xué)發(fā)光檢測試劑及制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010138129.4
• 申請日: 2020-03-03
• 公開（公告）號: CN111308092B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 梅義武;劉興;葉佳穎
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江卓運(yùn)生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 杭州斯可睿專利事務(wù)所有限公司 33241
• 代理人: 唐迅

1.一種均相法肌紅蛋白化學(xué)發(fā)光檢測試劑的制備方法，包括采用納米金顆粒和光敏劑，其特征是所述均相法肌紅蛋白化學(xué)發(fā)光檢測試劑是一種納米金-光敏劑復(fù)合物與肌紅蛋白單克隆抗體進(jìn)行偶聯(lián)體，獲得納米金顆粒后進(jìn)行納米金-光敏劑復(fù)合，所述納米金-光敏劑的復(fù)合是在納米金顆粒中加入水溶性光敏劑，并在室溫下暗室中攪拌過夜，然后通過離心最后得到沉淀的納米金-光敏劑復(fù)合物，然后再用緩沖液將納米金-光敏劑復(fù)合物復(fù)溶；復(fù)溶后的納米金-光敏劑復(fù)合物再與肌紅蛋白單克隆抗體進(jìn)行偶聯(lián)，所述納米金-光敏劑與肌紅蛋白單克隆抗體的偶聯(lián)是在復(fù)溶后的納米金-光敏劑復(fù)合物的溶液中加入肌紅蛋白單克隆抗體，調(diào)整反應(yīng)pH值至肌紅蛋白單克隆抗體的等電點，通過納米金顆粒所具有的電荷性將肌紅蛋白單克隆抗體在其等電點環(huán)境條件下使兩者產(chǎn)生靜電吸附，從而使肌紅蛋白單克隆抗體偶聯(lián)至納米金顆粒表面，再通過離心方式除去未結(jié)合的肌紅蛋白單克隆抗體，然后再加入復(fù)溶緩沖液進(jìn)行復(fù)溶，獲得懸浮于復(fù)溶緩沖液中的納米金-光敏劑復(fù)合物與肌紅蛋白單克隆抗體進(jìn)行偶聯(lián)體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種均相法肌紅蛋白化學(xué)發(fā)光檢測試劑的制備方法，其特征在于，所述納米金顆粒與光敏劑的摩爾比為2:1-10；所述水溶性光敏劑為卟啉衍生物、酞菁衍生物或葉綠素衍生物；所述的靜電吸附，其時間為1小時至2小時。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種均相法肌紅蛋白化學(xué)發(fā)光檢測試劑的制備方法，其特征在于所述的緩沖液為PBS、HEPES、硼酸鹽、碳酸鹽、Tris-HCl、檸檬酸中的一種；所述的復(fù)溶緩沖液為PBS、HEPES、碳酸鹽、Tris-HCl中的一種。