[發(fā)明專利]粗多糖及其制備工藝、保健口服液及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010137696.8
• 申請(qǐng)日: 2020-03-03
• 公開（公告）號(hào): CN111139277A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂兆豐;肖丹;馮鎂琳;陳世珩;單一峰;王楠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長春工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P19/04
• 分類號(hào): C12P19/04;C12N15/01;C12N1/14;C08B37/00;A61K9/08;A61K35/644;A61P39/06;A61P37/04;A61P39/00;C12R1/79
• 代理公司: 西安知誠思邁知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61237
• 代理人: 麥春明

1.粗多糖制備工藝，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，配置發(fā)酵培養(yǎng)基，使用發(fā)酵培養(yǎng)基在恒溫?fù)u床上對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌種進(jìn)行活化培養(yǎng)，活化培養(yǎng)過程中發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值為5.5～7.5，培養(yǎng)溫度為22℃～28℃，搖床的轉(zhuǎn)速為120rpm～180rpm；

發(fā)酵培養(yǎng)基中各物質(zhì)的質(zhì)量濃度如下：葡萄糖10g/L、酵母浸粉5g/L、KH₂PO₄ 1g/L、MgSO₄·7H₂O 0.5g/L、ZnSO₄·7H₂O 50mg/L、維生素B1 10mg/L；

步驟2，采用亞硝基胍溶液誘導(dǎo)活化的蝙蝠蛾擬青霉菌種發(fā)生突變，使用接種針將突變菌種逐一接種到250mL錐形瓶中，在26℃、轉(zhuǎn)速為150rpm的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)48h，獲得突變蝙蝠蛾擬青霉菌種，然后進(jìn)行連續(xù)傳代培養(yǎng)；

步驟3，配置添加有人參粉末的液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基，對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌種進(jìn)行液體深層發(fā)酵，液體深層發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)溫度為22℃～28℃，搖床的轉(zhuǎn)速為120rpm～180rpm；

步驟4，在步驟3的基礎(chǔ)上，對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌種進(jìn)行補(bǔ)料分批發(fā)酵放大培養(yǎng)獲得蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵液，放大培養(yǎng)時(shí)蝙蝠蛾擬青霉菌種的接種量為培養(yǎng)基體積的7%，培養(yǎng)基的pH值為7.0，放大培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)溫度為22℃～28℃，搖床的轉(zhuǎn)速為120rpm～180rpm；

步驟5，使用轉(zhuǎn)速為4000rpm的離心機(jī)處理蝙蝠蛾擬青霉發(fā)酵液15min后獲得蝙蝠蛾擬青霉菌絲體，將菌絲體煮沸、濃縮，使用乙醇沉淀法提取菌絲體中的粗多糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的粗多糖制備工藝，其特征在于，所述步驟1活化培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基的pH值為6.0，培養(yǎng)溫度為25℃，轉(zhuǎn)速為150rpm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的粗多糖制備工藝，其特征在于，所述步驟2中傳代培養(yǎng)的種子培養(yǎng)基由各物質(zhì)按照以下質(zhì)量百分?jǐn)?shù)配制而成：3%葡萄糖、2%酵母膏、0.2%硫酸鎂、0.1%磷酸氫二鉀，0.2%磷酸二氫鉀和0.03%氯化鈣，余量為水，種子培養(yǎng)基的pH值為6.0，酵母膏中的總氮含量≥9%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的粗多糖制備工藝，其特征在于，所述步驟3中液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基中各物質(zhì)的質(zhì)量濃度如下：玉米淀粉40g/L、葡萄糖5g/L、玉米漿25g/L、硫酸鎂1g/L、磷酸二氫鉀1g/L、硫酸鋅1.5g/L、維生素B1 25mg/L，培養(yǎng)基的pH值為7.0，液體深層發(fā)酵培養(yǎng)基中人參粉末添加質(zhì)量與發(fā)酵培養(yǎng)基體積的比為1：50。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的粗多糖制備工藝，其特征在于，所述步驟5中粗多糖的提取過程如下：

步驟51，稱取200g蝙蝠蛾擬青霉菌絲體置于500mL三角瓶中，向三角瓶中加入300mL蒸餾水和0.3g胃蛋白酶，將三角瓶置于往復(fù)式調(diào)速搖床中提取3h，搖床的轉(zhuǎn)速為170rpm、溫度為55℃；

步驟52，將三角瓶置于100℃的水浴鍋中加熱3h后自然冷卻至室溫，然后置于4℃冰箱冷藏過夜；

步驟53，將過夜的三角瓶置于轉(zhuǎn)速為4000rpm的離心機(jī)內(nèi)離心20min，棄去殘?jiān)@得上清液；

步驟54，將上清液轉(zhuǎn)移至200mL的容量瓶中加蒸餾水定容，再將定容的上清液轉(zhuǎn)移至1000mL的燒杯中，加入體積為上清液體積4倍的無水乙醇混合均勻，置于4℃冷藏室過夜；

步驟55，將過夜溶液置于轉(zhuǎn)速為4000rpm的離心機(jī)內(nèi)離心20min，棄去上清液獲得粗多糖醇沉產(chǎn)物；

步驟56，將粗多糖醇沉產(chǎn)物置于60℃的干燥箱中烘干至恒重，獲得粗多糖。

6.如權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的粗多糖制備工藝制備獲得的粗多糖。

7.如權(quán)利要求6所述的粗多糖制備的保健口服液，其特征在于，由以下體積百分?jǐn)?shù)的各原料制備而成：粗多糖9%、牛磺酸0.35%、蜂蜜4.0%、維生素B1 0.1%、維生素B2 0.1%、維生素B6 0.05%、維生素C0.1%、苯甲酸鈉0.04%及檸檬酸0.15%，余量為水。

8.如權(quán)利要求7所述的保健口服液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，按照以下體積百分?jǐn)?shù)量取各原料：粗多糖9%、牛磺酸0.35%、蜂蜜4.0%、維生素B10.1%、維生素B2 0.1%、維生素B6 0.05%、維生素C0.1%、苯甲酸鈉0.04%及檸檬酸0.15%，余量的水；

步驟2，將粗多糖升溫至30℃溶解后，在0.2MPa的壓力下使用孔徑為0.6μm的濾網(wǎng)精濾得到粗多糖提取母液；

步驟3，將粗多糖提取母液、維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素C、苯甲酸鈉及檸檬酸倒入配料罐中混合均勻；

步驟4，加入牛磺酸，充分?jǐn)嚢琛⒒旌希?/p>

步驟5，加熱煮沸滅菌30min，待溶液冷卻后，加入蜂蜜充分?jǐn)嚢琛⒒旌希?/p>

步驟6，加入純化水至配液量，使用孔徑為0.45μm的濾網(wǎng)過濾；

步驟7，使用摩爾濃度均為0.1mol/L的HCl溶液和NaOH溶液調(diào)節(jié)配液的pH值為5.0～6.0，配液的相對(duì)密度為1.15～1.25kg/cm³；

步驟8，將配液輸送至灌軋工序進(jìn)行灌裝、密封制得保健口服液。