[發明專利]一種樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法

在審

• 申請號: 202010137681.1
• 申請日: 2020-03-02
• 公開（公告）號: CN111226865A
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發明（設計）人: 吳敏;代解杰;劉曉晨;罕圓圓
• 申請（專利權）人: 云南省第二人民醫院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 于洪;陳左

1.一種樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：

所有實驗樹鼩均為成年健康樹鼩，年齡在2-3歲之間，體重150~200g，均在造模前，進行裂隙燈和雙目間接檢眼鏡檢查，排除眼部疾病；

腹腔內注射戊巴比妥鈉深度麻醉動物后，維持麻醉后維持動物體溫；激光光凝前25~30min，用復方托吡卡胺滴眼液滴眼以充分散大雙眼瞳孔；接著進行雙眼點表面麻醉，之后，用卡波姆眼用凝膠滴眼以預防角膜干燥，最后固定動物；

扒開實驗動物上下眼瞼，將一片蓋玻片正中央涂上卡波姆眼用凝膠后蓋在樹鼩角膜中央；在距視盤1PD的距離，將眼底均等劃分為圍繞視盤的N個區域，每個區域包含60°范圍視網膜；于每個區域中心，避開血管，等距離行氪離子激光光凝，每個區域1個激光斑，擊破Bruch膜；N個激光點距離視盤的距離相等，N個激光點之間的距離也相等；N=6~10；

分別于光凝前及光凝后3、7、14、21、28天，觀察造模后FFA/ICGA的特征，當FFA/ICGA均出現CNV典型表現，即視為建模成功。

2.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，在造模前，深度麻醉后，進行裂隙燈和雙目間接檢眼鏡檢查。

3.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，腹腔內注射戊巴比妥鈉深度麻醉動物時，麻醉劑量為4.5mg/kg。

4.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，維持麻醉后動物體溫的方式為：采用加熱墊維持麻醉后動物體溫。

5.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，用復方托吡卡胺滴眼液滴眼時，滴眼三次，每次1~2滴，相鄰兩次間隔5min。

6.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，雙眼點表面麻醉時，采用鹽酸奧布卡因滴眼液，滴眼兩次，每次1~2滴，兩次間隔2min。

7.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，用卡波姆眼用凝膠滴眼一次，用量1~2滴。

8.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，激光波長為647.1nm，光凝斑直徑50μm，曝光時間0.01s，能量從250mw開始，在周邊視網膜上進行能量的滴定根據視網膜的反應，調節能量大小，以光凝后有氣泡形成無視網膜出血，標志擊破Bruch膜，記為有效點。

9.根據權利要求8所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，如擊破小血管時，有出血，該眼不用于建模。

10.根據權利要求1所述的樹鼩脈絡膜新生血管動物模型的構建方法，其特征在于，所述的CNV典型表現為：在造影的早期出現激光病灶處染料滲漏，隨著時間延長滲漏面積不斷擴大。