[發明專利]兩種治療食管癌的活性單體、組合物及其應用

有效

• 申請號: 202010136418.0
• 申請日: 2020-03-02
• 公開（公告）號: CN111303239B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 司富春;王文彬;司高
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00;A61K31/7048;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州中鼎萬策專利代理事務所(普通合伙) 41179
• 代理人: 徐文婷

本發明公開了兩種治療食管癌的活性單體及其組合物和應用，技術方案是，本發明使用細胞模型，以活性追蹤為導向，采用醇提、層析色譜及高效液相色譜等現代提取分離技術，從具有抗癌活性的穿山龍、重樓兩種中藥中分別提取活性單體，并使用化學譜圖手段推測分子組成并確定各單體分子結構，以基線等比增減法確定單體用量比例，組合成治療食管癌的組合物，然后將活性單體及組合物作用于多種食管癌細胞，研究其對食管癌的作用機制。本發明提供的兩種活性單體及其組合物，均來源于天然藥物的提取，屬純中藥制劑，具有預防和治療食管癌的作用，具有很大的市場潛力和廣闊的市場應用前景。

技術領域

本發明涉及兩種治療食管癌的活性單體及其組合物和應用，具體涉及從穿山龍、重樓兩種中藥中分別提取的活性單體，以及組成的治療食管癌的組合物，屬于中醫藥技術領域。

背景技術

《2018年全球癌癥統計報告》顯示食管癌居惡性腫瘤發病的第七位，惡性腫瘤總體死亡的第六位，是嚴重危害人類健康的疾病，給社會和家庭帶來了沉重的經濟負擔。中醫藥治療食管癌可增強患者免疫力，減輕病人痛苦，提高其生存質量，雖實驗室和臨床均有治療食管癌的方藥使用，但還沒出現針對食管癌作用較強的單體方藥或單體提取物，限制了中醫藥的使用與推廣，中醫藥治療處于作為放化療及手術治療中和預后的輔助治療地位。因此，挖掘中醫藥寶庫，找到高效低毒藥物或提取有效單體物質并明確其作用機制成為當前食管癌治療亟待解決的科學問題。

穿山龍，Dioscorea nipponica Makino，性平、味苦；歸肝、腎、肺經；微寒清熱、活血通絡、祛風止痛、止咳、平喘；常用于治療咳嗽，痰熱咳喘，風濕性關節炎，腰腿疼痛，筋骨麻木，風寒濕痹，癰腫惡瘡等。臨床應用穿山龍浸膏成功治療甲狀腺瘤，急性化膿性骨關節炎，使用穿山龍片劑治療慢性支氣管炎等，且未發現不良副作用。重樓，Rhizomaparidis，性微寒，味苦；歸肝經；清熱解毒，消腫止痛，涼肝定驚。主治疔瘡癰腫，驚風抽搐，跌撲傷痛，熱氣在腹中?，F代藥理學研究表明重樓有抗腫瘤作用，且被廣泛應用。

目前沒有針對抗食管癌的穿山龍和重樓中最強活性單體的報道，更沒有出現活性單體組方的比例關系，藥物對食管癌細胞作用機制的研究也不系統。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的是提供一種從以穿山龍和重樓為原料，提取的活性單體及其組合物，以及其在治療食管癌中的應用。

為了實現上述目的，本發明的技術方案之一是提供治療食管癌的活性單體，由以下兩種方式制備而成：

(a)第一種方式：

(1)醇提：稱取穿山龍，用95％(v/v)乙醇溶液常溫浸泡后，抽濾，棄濾渣，濃縮，干燥得棕黃色固體；

(2)萃?。簩⒆攸S色固體溶于超純水中，然后正丁醇萃取，將萃取液旋蒸，干燥得正丁醇部位固體；

(3)大孔樹脂層析分離：正丁醇部位固體溶于超純水中，通過大孔樹脂層析柱，采用H₂O-EtOH體系洗脫，留取20％H₂O-80％EtOH部位洗脫液，干燥得20％H₂O-80％EtOH部位固體；

(4)ODS層析柱分離：將20％H₂O-80％EtOH部位固體溶于超純水中，通過ODS層析柱，采用H₂O-MeOH體系洗脫，留取70％H₂O-30％MeOH部位洗脫液，干燥，得到淡黃色固體；

(5)硅膠層析柱分離：使用CH₂Cl₂溶解淡黃色固體，濕法上樣，采用EtOAc-MeOH-H₂O體系洗脫，留取洗脫液，干燥；

(6)純化：使用葡聚糖凝膠分子篩、重結晶及高效液相純化，得到穿山龍活性單體；

(b)第二種方式：