[發明專利]兩種治療食管癌的活性單體、組合物及其應用

有效

• 申請號: 202010136418.0
• 申請日: 2020-03-02
• 公開（公告）號: CN111303239B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 司富春;王文彬;司高
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00;A61K31/7048;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州中鼎萬策專利代理事務所(普通合伙) 41179
• 代理人: 徐文婷

1.治療食管癌的活性單體的制備方法，其特征在于，由以下兩種方式制備而成：

（a）第一種方式：

（1）醇提：稱取穿山龍，用95%（v/v）乙醇溶液常溫浸泡后，抽濾，棄濾渣，濃縮，干燥得棕黃色固體；

（2）萃取：將棕黃色固體溶于超純水中，然后正丁醇萃取，將萃取液旋蒸，干燥得正丁醇部位固體；

（3）大孔樹脂層析分離：正丁醇部位固體溶于超純水中，通過大孔樹脂層析柱，采用H₂O-EtOH體系洗脫，留取20%H₂O-80%EtOH部位洗脫液，干燥得20%H₂O-80%EtOH部位固體；

（4）ODS層析柱分離：將20%H₂O-80%EtOH部位固體溶于超純水中，通過ODS層析柱，采用H₂O-MeOH體系洗脫，留取70%H₂O-30%MeOH部位洗脫液，干燥，得到淡黃色固體；

（5）硅膠層析柱分離：使用CH₂Cl₂溶解淡黃色固體，濕法上樣，采用EtOAc-MeOH-H₂O體系洗脫，留取洗脫液，干燥；

（6）純化：使用葡聚糖凝膠分子篩、重結晶及高效液相純化，得到穿山龍活性單體；

（b）第二種方式：

（1）醇提：稱取重樓，用95%（v/v）乙醇溶液常溫浸泡后，抽濾，棄濾渣，濃縮，干燥得棕黃色固體；

（2）萃取：將棕黃色固體溶于超純水中，然后正丁醇萃取，將萃取液旋蒸，干燥得正丁醇部位固體；

（3）大孔樹脂層析分離：正丁醇部位固體溶于超純水中，通過大孔樹脂層析柱，采用H₂O-EtOH體系洗脫，留取10%H₂O-90%EtOH部位洗脫液，干燥得10%H₂O-90%EtOH部位固體；

（4）ODS層析柱分離：將10%H₂O-90%EtOH部位固體溶于超純水中，通過ODS層析柱，采用H₂O-MeOH體系洗脫，留取40%H₂O-60%MeOH部位洗脫液，干燥，得到淡黃色固體；

（5）硅膠層析柱分離：使用CH₂Cl₂溶解淡黃色固體，濕法上樣，采用EtOAc-MeOH-H₂O體系洗脫，留取洗脫液，干燥；

（6）純化：使用葡聚糖凝膠分子篩、重結晶及高效液相純化，得到重樓活性單體。

2.根據權利要求1所述的治療食管癌的活性單體的制備方法，其特征在于，穿山龍和95%乙醇溶液的質量體積比為1 g：7 ml；重樓和95%乙醇溶液的質量體積比為1 g：7 ml。

3.根據權利要求1所述的治療食管癌的活性單體的制備方法，其特征在于，步驟（a）-（2）和（b）-（2）中固體和超純水的質量體積比為1 g：50 ml。

4.根據權利要求1所述的治療食管癌的活性單體的制備方法，其特征在于，步驟（a）-（3）和（b）-（3）中H₂O-EtOH體系為100%H₂O、70%H₂O-30%EtOH、50%H₂O-50%EtOH、30%H₂O-70%EtOH、20%H₂O-80%EtOH、10%H₂O-90%EtOH、100%EtOH，洗脫液體積為3倍柱體積。

5.根據權利要求1所述的治療食管癌的活性單體的制備方法，其特征在于，步驟（a）-（4）和（b）-（4）中H₂O-MeOH體系為70%H₂O-30%MeOH、60%H₂O-40%MeOH、50%H₂O-50%MeOH、40%H₂O-60%MeOH、30%H₂O-70%MeOH、20%H₂O-80%MeOH、100%MeOH，洗脫液體積為3倍柱體積。

6.根據權利要求1所述的治療食管癌的活性單體的制備方法，其特征在于，步驟（a）-（5）中EtOAc-MeOH-H₂O體系中EtOAc、MeOH、H₂O的體積比為8：2：0.5；步驟（b）-（5）中EtOAc-MeOH-H₂O體系中EtOAc、MeOH、H₂O的體積比為7：5：0.5；步驟（a）-（5）、（b）-（5）中洗脫液體積為3倍柱體積；步驟（a）-（6）中高效液相純化的條件為V_MeOH:V_H2O=82:18，紫外吸收波長207nm，流速2ml/min；步驟（b）-（6）中高效液相純化的條件為V_MeOH:V_H2O=65:35，紫外吸收波長254nm，流速2ml/min。