[發(fā)明專利]一種無(wú)刺花椒組培苗的繼代繁育方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010136322.4
• 申請(qǐng)日: 2020-03-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111280056A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳澤雄;唐寧;婁娟;許鋒;劉霞;劉華敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶文理學(xué)院;長(zhǎng)江大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京匯澤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228
• 代理人: 武君

本發(fā)明公開(kāi)了一種無(wú)刺花椒組培苗的繼代繁育方法，屬于經(jīng)濟(jì)作物無(wú)性繁殖技術(shù)領(lǐng)域。具體包括以下步驟：初代培養(yǎng)、切割和繼代增殖培養(yǎng)，繼代增殖培養(yǎng)直至培養(yǎng)基中PPM用量降為0時(shí)結(jié)束，且繼代增殖培養(yǎng)代數(shù)不少于4代。本發(fā)明的無(wú)刺花椒組培苗的繼代繁育方法，通過(guò)對(duì)培養(yǎng)條件的優(yōu)化，根據(jù)繼代培養(yǎng)的次數(shù)適當(dāng)調(diào)整培養(yǎng)基成分組成，以及特殊切割工藝等因素的綜合研究，建立了無(wú)刺花椒組培種苗繼代培養(yǎng)的技術(shù)體系，使得無(wú)刺花椒初代培養(yǎng)的莖段快速穩(wěn)定的實(shí)現(xiàn)繼代增殖，從而在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的繁育，在無(wú)刺花椒繁育生產(chǎn)中具有極大的實(shí)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于經(jīng)濟(jì)作物無(wú)性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種無(wú)刺花椒組培苗的繼代繁育方法。

背景技術(shù)

花椒是蕓香科花椒屬(Zanthoxylum Linn.)的一種香料植物，在我國(guó)有悠久的栽培歷史，既是香料植物也是傳統(tǒng)的藥用植物，栽培花椒兼具很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和水土保持效益。花椒在我國(guó)分布于黃河、長(zhǎng)江、珠江流域各省及云南、貴州和西藏等地，按照商品類型可區(qū)分為北方紅花椒、南方青花椒及產(chǎn)于山東的香花椒。

我國(guó)現(xiàn)已栽種花椒約200萬(wàn)hm²，年總產(chǎn)值約600億元，花椒已成為支撐我國(guó)5000多萬(wàn)山區(qū)農(nóng)民經(jīng)濟(jì)來(lái)源的支柱型經(jīng)濟(jì)樹種。然而，由于花椒樹干、枝、葉具刺，導(dǎo)致采收困難、成本極高。2011年花椒的采收成本約占銷售收入的1/2-2/3，全國(guó)200萬(wàn)hm²花椒的年采收成本達(dá)300-400億元。因此，花椒采收難已是花椒生產(chǎn)中亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題，若能以無(wú)刺花椒品種替代有刺花椒，將會(huì)大幅度的提高采收效率、節(jié)約采收成本。

20世紀(jì)50年代以來(lái)，我國(guó)先后進(jìn)行花椒品種改良，并斷斷續(xù)續(xù)進(jìn)行了無(wú)刺花椒品種發(fā)掘和培育研究。20世紀(jì)80年代初，我國(guó)從日本引進(jìn)了“日本無(wú)刺花椒”，試栽于河北、河南等地，1994年日本在四川實(shí)施援助項(xiàng)目時(shí)也將其引入四川，2010年又自河北引入陜西鳳縣；由于“日本無(wú)刺花椒”與我國(guó)的花椒有本質(zhì)的不同，其麻香味不足、產(chǎn)量不高、果面腺點(diǎn)深陷口狀、抗寒性弱，我國(guó)南方的青花椒、北方的紅花椒麻香味濃烈、高產(chǎn)、果面腺點(diǎn)泡狀鼓出，因而一直未能在我國(guó)花椒生產(chǎn)中推廣栽培。

目前，無(wú)刺花椒樹的繁育方法主要為嫁接繁殖，但是嫁接周期比較長(zhǎng)，受外界環(huán)境條件和病蟲害影響大，使得嫁接無(wú)刺花椒的苗木質(zhì)量差、成活率低，從而影響了花椒的質(zhì)量和產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種無(wú)刺花椒組培苗的繼代繁育方法。以解決無(wú)刺花椒采用嫁接繁殖的成活率低和產(chǎn)量低的問(wèn)題，

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種無(wú)刺花椒組培苗的繼代繁育方法，包括以下步驟：

S1、初代培養(yǎng)：將無(wú)刺花椒萌芽莖段置于培養(yǎng)基中，并在黑暗環(huán)境中培養(yǎng)5～9天，再置于光照強(qiáng)度為900～1100lux條件下培養(yǎng)6～8天，然后將光照強(qiáng)度增加至1900～2100lux培養(yǎng)12～16天，直至無(wú)刺花椒萌芽莖段生長(zhǎng)至高度3～4cm，3～4個(gè)節(jié)間，且腋芽萌發(fā)數(shù)量不少于2個(gè)；

S2、切割：將經(jīng)過(guò)初代培養(yǎng)的無(wú)刺花椒萌芽莖段置于超凈工作臺(tái)上的無(wú)菌接種盤中，用滅菌的工具將無(wú)刺花椒萌芽莖段的基部即浸入培養(yǎng)基的一端的組織切除，露出新鮮組織，然后切成1～3片葉莖段；

S3、第二代培養(yǎng)：將S2中切割好的莖段置于培養(yǎng)基中，并在黑暗環(huán)境中培養(yǎng)5～9天后，及時(shí)置于光照強(qiáng)度為900～1100lux條件下培養(yǎng)6～8天，然后將光照強(qiáng)度增加至1900～2100lux培養(yǎng)12～16天，直至莖段生長(zhǎng)至高度3～4cm，3～4個(gè)節(jié)間，且腋芽萌發(fā)數(shù)量不少于2個(gè)；

所述初代培養(yǎng)和第二代培養(yǎng)過(guò)程中的培養(yǎng)基成分組成為：MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、玉米素(ZT)為2.0mg·L-¹、萘乙酸(NAA)為0.1mg·L^-1、卡拉膠為6.0g·L^-1、蔗糖為30g·L^-1和植物組培抗菌劑為(PPM)0.1％；