[發(fā)明專利]高效液相色譜法測(cè)定貝芪益肺片中貝母素甲、黃芪甲苷的含量方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010133966.8
• 申請(qǐng)日: 2020-03-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111289641A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柳運(yùn)波;楊靜;楊坤;韓輝;李春娥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 通化吉通藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了一種高效液相色譜法測(cè)定貝芪益肺片中貝母素甲、黃芪甲苷的含量方法，屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，包括以下步驟：S1、對(duì)照品溶液的制備；S2、供試品溶液的制備；S3、依次量取對(duì)照品儲(chǔ)備液I、對(duì)照品儲(chǔ)備液II和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀測(cè)定。本發(fā)明的高效液相色譜法測(cè)定貝芪益肺片中貝母素甲、黃芪甲苷的含量方法，操作簡(jiǎn)單、快速，替代現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)的薄層色譜法測(cè)定黃芪甲苷含量，并增加了醇提藥味?貝母素甲的含量測(cè)定項(xiàng)，一次操作即可同時(shí)完成兩項(xiàng)含量測(cè)定，方法簡(jiǎn)單，快速，測(cè)定出貝母素甲、黃芪甲苷的含量準(zhǔn)確，靈敏度高，評(píng)價(jià)貝芪益肺片的方法更加全面，進(jìn)一步保證了產(chǎn)品質(zhì)量和療效，符合藥品質(zhì)量控制的要求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種高效液相色譜法測(cè)定貝芪益肺片中貝母素甲、黃芪甲苷的含量方法。

背景技術(shù)

貝芪益肺片來(lái)源于山東臨沂陳秋齡先生經(jīng)驗(yàn)方，該方在山東、東北一帶用于治療肺癆近百年，后傳于長(zhǎng)子陳作恩先生，陳作恩先生行醫(yī)過(guò)程中結(jié)合中醫(yī)治療原則及當(dāng)時(shí)肺結(jié)核的發(fā)病特點(diǎn)，將家傳經(jīng)驗(yàn)方散劑不斷加以完善、改進(jìn)，逐漸形成固定配方并制成中成藥蜜丸應(yīng)用于臨床。2002年經(jīng)通化市結(jié)核病醫(yī)院引進(jìn)，療效確切。2003年獲吉林省院內(nèi)制劑文號(hào)(吉藥制字Z03A0004)，經(jīng)不同類型的肺結(jié)核患者治療觀察，該品種單獨(dú)用藥可明顯改善患者體質(zhì)及臨床癥狀，促進(jìn)病灶吸收和空洞閉合；與化療藥聯(lián)合應(yīng)用可減輕其毒副作用，使患者順利完成常規(guī)化療，加快痰菌陰轉(zhuǎn)及病灶吸收。

方中黃芪大補(bǔ)脾肺之氣，既通過(guò)滋養(yǎng)肺陰，補(bǔ)脾助肺，以助生化之源，又能固表止汗為君藥，麥冬育陰養(yǎng)榮，填補(bǔ)精血，百合得土金之氣潤(rùn)肺止咳，又能清肺中虛熱，共為臣藥，佐以貝母潤(rùn)肺止咳，百部、白及補(bǔ)肺殺蟲(chóng)，三七化瘀止血，桔梗開(kāi)宣肺氣，祛痰排膿；三七為止血要藥，止血不留瘀血，與貝母、白及合用以堅(jiān)斂肺臟、封填破損，死肌可去、瘀血可散，有托舊生新之妙用。使以魚(yú)腥草、胡黃連、貓爪草清熱散結(jié)、化痰止咳。上藥合力共奏益氣養(yǎng)陰、潤(rùn)肺止咳、生肌止血之功，攻補(bǔ)兼施，諸癥自消。

現(xiàn)代研究表明黃芪含有多種化學(xué)成分，如皂苷類，黃酮類，木脂素類，氨基酸類，多糖類及多種微量元素等。其所含的三萜皂苷類化合物-黃芪甲苷，是黃芪的主要的有效成分，也是貝芪益肺片的主要有效成分。因此，作為貝芪益肺片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)手段，黃芪甲苷含量測(cè)定的準(zhǔn)確與是保證產(chǎn)品療效的技術(shù)關(guān)鍵。

然而，目前貝芪益肺片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中黃芪甲苷含量測(cè)定采用的是薄層色譜掃描法。但薄層色譜掃描法操作較繁瑣，且受影響因素較多，結(jié)果不夠準(zhǔn)缺。如薄層層析時(shí)，展開(kāi)溫度，展開(kāi)系統(tǒng)的飽和性，所用硅膠板顆粒的大小，硅膠板的緊密性等都會(huì)影響黃芪甲苷的含量測(cè)定，雖然用了共薄層的方法消除了部分誤差，但各次實(shí)驗(yàn)間的重現(xiàn)性較差。此外，為了排除其它成分的干擾和背景的干擾，須經(jīng)過(guò)多步分離純化，而且在純化過(guò)程中黃芪甲苷的損失也較多。同時(shí)，現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測(cè)定僅有黃芪甲苷一項(xiàng)，評(píng)價(jià)貝芪益肺片的方法不夠全面，不足以保證產(chǎn)品質(zhì)量和療效。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對(duì)上述技術(shù)問(wèn)題，提供一種高效液相色譜法測(cè)定貝芪益肺片中貝母素甲、黃芪甲苷的含量方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下：

一種高效液相色譜法測(cè)定貝芪益肺片中貝母素甲、黃芪甲苷的含量方法，包括以下步驟：

S1、對(duì)照品溶液的制備：稱取貝母素甲和黃芪甲苷對(duì)照品各10mg，置不同10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對(duì)照品儲(chǔ)備液I；量取上述中各對(duì)照品儲(chǔ)備液I適量混勻，以甲醇稀釋成含貝母素甲50μg/mL、黃芪甲苷100μg/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備液II；

S2、供試品溶液的制備：稱取樣品0.5000g，加入甲醇索氏提取4小時(shí)，減壓濃縮至10mL，過(guò)濾即得；