[發(fā)明專利]一種用芳香醛修飾殼寡糖制備殼寡糖單體的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010133781.7
• 申請(qǐng)日: 2020-03-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111171182B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-09-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陽(yáng)文靜;游清徽;孫晨松;蔡險(xiǎn)峰;徐賢柱;王曼瑩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江西師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B37/08
• 分類號(hào): C08B37/08;C07H5/06;C07H1/00
• 代理公司: 南昌市平凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 36122
• 代理人: 夏材祥

本發(fā)明提供了一種用芳香醛修飾殼寡糖制備殼寡糖單體的方法，該方法先將殼寡糖溶解并加入芳香醛修飾，然后上樣到大孔樹(shù)脂層析柱，用0?70%的乙醇水溶液梯度洗脫，同時(shí)采用紫外檢測(cè)器以波長(zhǎng)260?280nm在線監(jiān)測(cè)芳香醛修飾殼寡糖單體的出峰情況，收集相應(yīng)芳香醛修飾殼寡糖單體洗脫液，旋蒸除去乙醇，以稀鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為1.5?2.5，室溫?cái)嚢璩浞轴尫懦鲇坞x芳香醛和殼寡糖單體，加入大孔樹(shù)脂吸附游離芳香醛，獲得殼寡糖單體溶液，旋蒸除去殘留的鹽酸，最后冷凍干燥，獲得可長(zhǎng)期保存的殼寡糖單體鹽酸鹽固體粉末。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用芳香醛修飾殼寡糖制備殼寡糖單體的方法。

背景技術(shù)

殼寡糖是殼聚糖的降解產(chǎn)物，具有多種生物活性，如抗腫瘤、抗氧化、抑菌、免疫調(diào)節(jié)等。然而以往的文獻(xiàn)報(bào)道中，均是采用含有不同分子量的殼寡糖混合物進(jìn)行的生物活性研究，這使得很難明確具體哪個(gè)或哪些寡糖單體在生物活性中發(fā)揮作用，也限制了對(duì)機(jī)理的深入研究。因此，為了進(jìn)一步研究殼寡糖的生物活性，制備特定聚合度的殼寡糖單體是非常必要的。

但由于殼寡糖單體間電荷密度和分子量差別較小，使得其分離純化非常困難，尤其對(duì)聚合度大于4的殼寡糖的分離更是困難。因此，制備殼寡糖單體的方法是殼寡糖研究的重要方向之一。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種用芳香醛修飾殼寡糖制備殼寡糖單體的方法，包括如下步驟：

S1、以去離子水為溶劑配制殼寡糖溶液，攪拌至殼寡糖完全溶解成澄清溶液，并置于35-45℃的水浴鍋中恒溫?cái)嚢瑁?/p>

S2、在步驟S1得到的溶液中加入芳香醛，用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH為8.0-8.2，繼續(xù)恒溫?cái)嚢?2-24h，獲得芳香醛修飾殼寡糖溶液；

S3、將步驟S2得到的芳香醛修飾殼寡糖溶液冷卻至20-25℃，以20-30%的上樣體積上樣到大孔樹(shù)脂層析柱，靜態(tài)吸附1-2h，讓芳香醛修飾殼寡糖充分吸附到大孔樹(shù)脂；

S4、將步驟S3得到的吸附芳香醛修飾殼寡糖的大孔樹(shù)脂用0-70%的乙醇水溶液梯度洗脫，再采用紫外檢測(cè)器在以波長(zhǎng)260-280nm在線監(jiān)測(cè)芳香醛修飾殼寡糖單體的出峰情況，收集相應(yīng)芳香醛修飾殼寡糖單體洗脫液；

S5、將步驟S4得到的芳香醛修飾殼寡糖單體洗脫液在溫度為40-50℃條件下旋蒸3-5h除去乙醇，再加入質(zhì)量百分比濃度為1-3%的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為1.5-2.5，在溫度為15-25℃條件下攪拌12-24h，中間每隔2-3h調(diào)節(jié)一次pH為1.5-2.5，以充分釋放出游離芳香醛和殼寡糖單體；

S6、向步驟S5釋放出游離芳香醛和殼寡糖單體的溶液中加入25-35%體積大孔樹(shù)脂，在溫度為15-25℃條件下攪拌5-10h，吸附游離芳香醛，獲得殼寡糖單體溶液；

S7、將步驟S6得到的殼寡糖單體溶液在溫度為40-50℃條件下旋蒸3-5h，除去殘留的鹽酸，然后冷凍干燥，獲得可長(zhǎng)期保存的殼寡糖單體鹽酸鹽固體粉末。

其中，所述步驟S1中，殼寡糖溶液的質(zhì)量百分比濃度為1.0-3.0%。

優(yōu)選地，殼寡糖溶液的質(zhì)量百分比濃度為1.5%，2.0%，2.5%。

其中，所述步驟S2中，芳香醛的質(zhì)量百分比濃度為0.5%-2.0%。

優(yōu)選地，芳香醛的質(zhì)量百分比濃度為1.0%，1.1%，1.2%，1.5%。

其中，所述殼寡糖的平均分子量低于1000。

優(yōu)選地，所述殼寡糖的平均分子量?jī)?yōu)選為400-600。

其中，所述芳香醛為可以作為食品添加劑使用的任何一種芳香醛。