[發明專利]一種超高效液相色譜串聯質譜法測定防己黃芪湯中十九種成分含量的方法

在審

• 申請號: 202010133222.6
• 申請日: 2020-03-01
• 公開（公告）號: CN111272934A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 李愛平;楊柳;秦雪梅;張麗增
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 太原晉科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 翟沖燕

本發明屬中藥成分檢測技術領域，提供一種超高效液相色譜串聯質譜法測定防己黃芪湯中十九種成分含量的方法，分別制備供試品溶液、對照品溶液、混合標準品溶液，超高效液相色譜串聯質譜檢測混合標準品溶液，繪制標準曲線和供試品溶液，用超高效液相色譜串聯質譜進行質譜正、負離子模式分析，根據標準曲線得供試品防己黃芪湯中十九種成分含量。該方法靈敏度高、重現性好，分析準確可靠，可同時定量檢測防己黃芪湯中19種化學成分：芒柄花苷、芒柄花素、毛蕊異黃酮、毛蕊異黃酮苷、紫檀烷、紫檀烷苷、異黃烷、甘草素、甘草苷、甘草次酸、粉防己堿、防己諾啉堿、白術內酯Ⅰ、白術內酯ⅡⅠ、異黃烷苷、黃芪皂苷Ⅰ、黃芪皂苷Ⅱ、黃芪皂苷Ⅲ和黃芪皂苷Ⅳ。

技術領域

本發明屬于中藥成分檢測技術領域，具體涉及一種超高效液相色譜串聯質譜法測定防己黃芪湯中十九種成分含量的方法。

背景技術

防己黃芪湯始載于《金匱要略》，全方由防己、黃芪、白術、甘草、生姜、大棗組成，具有固表益氣、祛風利濕等功效。近年來關于防己黃芪湯在臨床上的應用主要集中于慢性心衰、心源性水腫、類風濕關節炎、慢性腎小球腎炎、腎病綜合征等疾病，確切的利水藥理作用使得防己黃芪湯近年來越來越受到關注。然而，現有的研究多集中在臨床以及藥理作用上，對其化學成分的研究較少。為了更好地研究防己黃芪湯，保證其生產質量和臨床應用，急需提供對防己黃芪湯化學成分分析的方法。

中藥藥效作用的發揮有賴于其所含的化學成分，且化學成分含量的高低和穩定性直接影響了其藥效作用的強弱。中藥作為一個整體，強調的是各味藥的協同作用。中藥中單一有效成分或指標成分控制，難以真正控制藥品質量，而采用多指標多成分的含量測定方法將成為中藥未來質量控制的方法的主流。隨著現代分析技術的發展，超高效液相色譜串聯質譜由于其分離速度快，超高靈敏度，測定專屬性強而被廣泛運用于中藥及復方制劑的分析中。

發明內容

本發明的目的在于提供一種超高效液相色譜串聯質譜法測定防己黃芪湯中十九種成分含量的方法，該方法靈敏度高、重現性好，分析準確、可靠，可滿足同時定量檢測防己黃芪湯中十九種化學成分（芒柄花苷、芒柄花素、毛蕊異黃酮、毛蕊異黃酮苷、紫檀烷、紫檀烷苷、異黃烷、甘草素、甘草苷、甘草次酸、粉防己堿、防己諾啉堿、白術內酯Ⅰ、白術內酯ⅡⅠ、異黃烷苷、黃芪皂苷Ⅰ、黃芪皂苷Ⅱ、黃芪皂苷Ⅲ和黃芪皂苷Ⅳ）。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種超高效液相色譜串聯質譜法測定防己黃芪湯中十九種成分含量的方法，其特征在于：具體步驟如下：

(1)供試品溶液的制備：精密稱取防己黃芪湯凍干粉末35mg、300mg各一份分別于離心管中，分別加入甲醇1mL，渦旋1min混勻，控制超聲溫度：30℃，頻率：30KHz超聲處理30min，13000r/min的條件下離心15min，取上清，即得供試品溶液1 號和2號，分別用于超高效液相色譜串聯質譜正、負離子模式分析；

（2）對照品溶液的制備：取芒柄花苷、芒柄花素、毛蕊異黃酮、毛蕊異黃酮苷、紫檀烷、紫檀烷苷、異黃烷、甘草素、甘草苷、甘草次酸、粉防己堿、防己諾啉堿、白術內酯Ⅰ、白術內酯ⅡⅠ、異黃烷苷、黃芪皂苷Ⅰ、黃芪皂苷Ⅱ、黃芪皂苷Ⅲ和黃芪皂苷Ⅳ對照品精密稱定，分別置5mL容量瓶中，加入甲醇定容，制成濃度分別為0.624mg/mL、0.576mg/mL、0.432mg/mL、0.683mg/mL、0.462mg/mL、0.326mg/mL、0.722mg/mL、0.428mg/mL、0886mg/mL、0.550mg/mL、0.438mg/mL、0.440mg/mL、0.434mg/mL、0.642mg/mL、0.580mg/mL、1.100mg/mL、0.980mg/mL、0.500mg/mL和0.600mg/mL的對照品溶液；