[發明專利]一種脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6′-O-D-葡萄糖酯的方法

有效

• 申請號: 202010132118.5
• 申請日: 2020-02-29
• 公開（公告）號: CN111411137B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 羅錫平;杜理華;陳平峰
• 申請（專利權）人: 浙江農林大學
• 主分類號: C12P19/60
• 分類號: C12P19/60;C12M1/40;C12M1/02;C12M1/00;B01J19/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;朱思蘭

一種脂肪酶催化在線合成8?甲氧基香豆素?3?羧酸?6'?O?D?葡萄糖酯的方法：將脂肪酶Lipozyme?RM?IM均勻填充在微流控通道反應器的反應通道中，將8?甲氧基香豆素?3?羧酸甲酯、D?葡萄糖各自用反應溶劑溶解后，分別通過第一注射器、第二注射器注入管道匯總后，進入反應通道內進行反應，控制反應溫度為30～60℃，混合液在反應通道內的連續流動反應時間為10～60min，流出反應通道的反應液通過產物收集器在線收集，經后處理，得到產物8?甲氧基香豆素?3?羧酸?6'?O?D?葡萄糖酯(I)；該法具有反應時間短、產率高、選擇性好的優點。

技術領域

本發明涉及一種脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6′-O-D-葡萄糖酯的方法。

背景技術

香豆素是多種植物次生代謝產物和微生物代謝產物中的一種基本結構亞單位，具有一系列具有吸引力的生物活性，包括抗菌、抗凝劑、抗病毒、抗結核、抗氧化劑和抗腫瘤等活性。臨床上已經應用了幾種含有香豆素支架的天然合成藥物，如華法林作為維生素K拮抗劑的抗凝劑，在血栓治療中得到了廣泛應用，常用的抗生素蜜環素A和新生霉素均含有香豆素亞結構單元。此外，由于香豆素的母體結構，它被廣泛應用于特定的熒光探針、染料和熒光成像等領域。其中，含糖分支的香豆素衍生物的合成在有機和醫藥研究和開發中引起了相當大的關注。含糖香豆素的有趣之處在于這些化合物具有良好的水溶性。這些結果可改善藥物的理化、生物藥劑學和藥動學性質。索爾森等人的研究表明華法林的糖基化引起了從抗凝劑到抗癌活性的轉變，他們證明華法林的糖基化可以顯示出比原化合物高70倍的抗癌活性。這項研究清楚地說明了附加的糖對于改變香豆素母體藥物的作用機制和效力是至關重要的。在過去的幾年里，有幾項關于含糖香豆素的研究被報道。蘇普蘭等人合成了一系列糖基香豆素碳酸酐酶IX和XII抑制劑，對原發性乳腺腫瘤的生長有很強的抑制作用。2016年，Nilsson等人報道了一種選擇性半乳糖香豆素衍生物galetin-3抑制劑，在博萊霉素誘導的肺纖維化的小鼠模型中顯示出與已知的非選擇性galetin-1/galetin-3抑制劑相似的效果。

含糖衍生物的構建可以通過基本的合成方法來實現，最常見的合成策略是化學方法。通過“保護”或“保護脫保護”步驟，糖上特定活潑羥基被選擇性合成。可見光最近也被報道為糖基化催化劑，然而，大多數用于光誘導糖基化的方案要求過渡金屬催化劑與昂貴的添加劑或氧化劑結合以進行反應。因此，用化學方法引入糖仍然受到區域和立體選擇性差、官能團保護和脫保護冗長等缺點的限制。

生物催化劑作為一種高效綠色的生物轉化工具，在有機合成中引起了化學家和生物化學家的廣泛關注。特別是生物催化中的催化混配，即利用舊酶形成新的鍵并遵循新的途徑，得到了極大的擴展和迅速的擴展。一些酶，如工程化C-糖基轉移酶(micgtb-gagm)，已被應用于香豆素C-糖苷的合成，其中合成的兩個C-葡萄糖苷具有很強的SGLT2抑制活性。酶催化的反應相對溫和、綠色，但要達到預期結果需要較長的反應時間(通常長到24小時或更長)，有些反應依賴于昂貴的酶。近年來，連續流動微反應器與酶聯用已成為縮短反應時間、提高收率的有效途徑。

現代合成化學面臨著向社會提供高性能、環保、低成本、安全和原子效率的有價值產品的挑戰。在這方面，連續流微反應器技術(MRT)作為傳統分批化學合成的替代品越來越流行。特別是，就綠色化學的12項原則而言，MRT可以在改善化學過程中發揮主要作用。微反應器裝置的高表面體積比，導致更好的熱交換和有效的混合，從而提高反應效率。此外，MRT系統在科學之初就包含了反應規模，允許在緊湊、可重構的設備中有效地按需生成化合物。在這種情況下，“向外擴展”或“向上編號”指的是并行操作的連續流系統陣列，以滿足所需的輸出。流動化學，特別是連續流動系統中的催化劑/基質條件，可以提高反應性和選擇性。同時，在連續流塔中填充多相催化劑時，催化劑和產物的分離非常容易。為了探索含糖香豆素的新的、生態友好的和高效的方案，以及作為我們正在進行的新型含糖藥物開發研究的一部分，我們研究發現了微通道反應器中脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6′-O-D-葡萄糖酯的方法，旨在尋找一種高效環保的8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6′-O-D-葡萄糖酯的在線可控選擇性合成方法。

發明內容