[發(fā)明專利]一種脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6′-O-D-葡萄糖酯的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010132118.5
• 申請日: 2020-02-29
• 公開（公告）號: CN111411137B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅錫平;杜理華;陳平峰
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號: C12P19/60
• 分類號: C12P19/60;C12M1/40;C12M1/02;C12M1/00;B01J19/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;朱思蘭

1.一種脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6'-O-D-葡萄糖酯的方法，其特征在于，所述方法為：

將脂肪酶Lipozyme?RM?IM均勻填充在微流控通道反應(yīng)器的反應(yīng)通道中，將8-甲氧基香豆素-3-羧酸甲酯、D-葡萄糖各自用反應(yīng)溶劑溶解后，分別通過第一注射器、第二注射器注入管道匯總后，進(jìn)入反應(yīng)通道內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)，控制反應(yīng)溫度為30～60℃，混合液在反應(yīng)通道內(nèi)的連續(xù)流動反應(yīng)時間為10～60min，流出反應(yīng)通道的反應(yīng)液通過產(chǎn)物收集器在線收集，經(jīng)后處理，得到產(chǎn)物8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6'-O-D-葡萄糖酯(I)；

所述反應(yīng)溶劑為二甲基亞砜和叔戊醇的混合溶劑，其中二甲基亞砜與叔戊醇的體積比為1：8～20；

進(jìn)入反應(yīng)通道內(nèi)的混合液中，8-甲氧基香豆素-3-羧酸甲酯、D-葡萄糖的物質(zhì)的量之比為1：0.2～3；

所述后處理的方法為：所得反應(yīng)液減壓蒸餾除去溶劑，進(jìn)行硅膠柱層析分離，用200-300目硅膠濕法裝柱，以二氯甲烷和甲醇體積比＝10：1.5的混合液為洗脫劑，TLC跟蹤洗脫進(jìn)程，收集含目標(biāo)化合物的洗脫液，蒸除溶劑并干燥，得到產(chǎn)物8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6'-O-D-葡萄糖酯(I)；

2.如權(quán)利要求1所述脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6'-O-D-葡萄糖酯的方法，其特征在于，所述8-甲氧基香豆素-3-羧酸甲酯、D-葡萄糖各自用反應(yīng)溶劑溶解后，所得8-甲氧基香豆素-3-羧酸甲酯溶液、D-葡萄糖溶液的物質(zhì)的量濃度之比為1：0.2～3；所述8-甲氧基香豆素-3-羧酸甲酯溶液、D-葡萄糖溶液分別通過第一注射器、第二注射器注射時，流速相同。

3.如權(quán)利要求1所述脂肪酶催化在線合成8-甲氧基香豆素-3-羧酸-6'-O-D-葡萄糖酯的方法，其特征在于，催化劑脂肪酶Lipozyme?RM?IM的加入量以反應(yīng)介質(zhì)的體積計為0.025～0.05g/mL。