[發明專利]斑石鯛虹彩病毒主要衣殼蛋白的原核表達及多克隆抗體的制備和應用在審
| 申請號: | 202010130275.2 | 申請日: | 2020-02-28 |
| 公開(公告)號: | CN111320676A | 公開(公告)日: | 2020-06-23 |
| 發明(設計)人: | 魏京廣;秦啟偉;黃友華;黃曉紅;周勝 | 申請(專利權)人: | 華南農業大學 |
| 主分類號: | C07K14/01 | 分類號: | C07K14/01;C12N15/70;C07K16/08;G01N33/569 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 段卉 |
| 地址: | 510642 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 斑石鯛 虹彩 病毒 主要 蛋白 表達 克隆 抗體 制備 應用 | ||
1.一種含斑石鯛虹彩病毒MCP基因的原核表達載體,其特征在于,由斑石鯛虹彩病毒MCP基因插入表達載體獲得;所述MCP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根據權利要求1所述的原核表達載體,其特征在于,所述原核表達載體為pET-28a-MCP。
3.一種斑石鯛虹彩病毒MCP重組蛋白,其特征在于,由權利要求1或2所述的原核表達載體表達而得到。
4.權利要求1所述原核表達載體或權利要求3所述重組蛋白在制備斑石鯛虹彩病毒MCP多克隆抗體中的應用。
5.一種制備斑石鯛虹彩病毒MCP多克隆抗體的方法,其特征在于,包括以下步驟:
將權利要求3所述的重組蛋白純化后采用皮下多點注射免疫5~8周齡雄性BALB/c小鼠,第一次免疫小鼠時將重組蛋白與完全佐劑等體積混勻并充分乳化,以后三次免疫小鼠時重組蛋白與不完全佐劑等體積混勻;每隔1~2周進行一次免疫。
6.權利要求5所述方法制備得到的多克隆抗體。
7.權利要求6所述多克隆抗體在檢測斑石鯛虹彩病毒中的應用。
8.一種檢測斑石鯛虹彩病毒的方法,其特征在于,利用權利要求6所述方法制備得到的多克隆抗體進行檢測。
9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于,所述多克隆抗體的效價為1:1000~1:64000。
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