[發明專利]一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法與應用

在審

• 申請號: 202010129845.6
• 申請日: 2020-02-28
• 公開（公告）號: CN111272894A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 何盼;李震宇;秦雪梅
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86;G01N30/64;G01N30/06
• 代理公司: 太原申立德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14115
• 代理人: 郭海燕

1.一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟1，取地龍藥材粉末加入到甲醇水混合溶液中，經渦旋，超聲提取，離心移上清旋干得到地龍提取物；

步驟2，用氘代甲醇與重水的混合溶液溶解地龍提取物，離心，移取上清液做核磁共振測試，譜圖導入核磁數據處理軟件，獲得地龍藥材1H NMR指紋圖譜；

步驟3，對地龍1H NMR圖譜進行指認，利用對照品結合核磁共振峰的化學位移及耦合常數分析，確定地龍指紋圖譜的特征峰。

2.根據權利要求1所述的一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：所述步驟1中地龍藥材粉末的用量為100～500mg；所述甲醇水混合溶液中的甲醇體積濃度為20％～60％。

3.根據權利要求1所述的一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：所述步驟1中甲醇水混合溶液的體積為6mL。

4.根據權利要求1所述的一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：所述步驟1中超聲提取時間為10～30min。

5.根據權利要求1所述的一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：所述步驟2中氘代甲醇與重水的體積比為1:1；所述氘代甲醇與重水的混合溶液的體積為600～1000μL。

6.根據權利要求1所述的一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：所述步驟2中離心時間為20min；離心機轉速為13000r·min^-1；移取上清液的體積為600μL于核磁管中。

7.根據權利要求1所述的一種地龍1H NMR指紋圖譜的構建方法，其特征在于：所述地龍指紋圖譜的特征峰包括：亮氨酸(δ＝0.98±0.02,d,J＝8.4Hz)、異亮氨酸(δ＝1.03±0.02,d,J＝7.2Hz)、纈氨酸(δ＝1.06±0.02,d,J＝7.2Hz)、乳酸(δ＝1.33±0.02,d,J＝7.2Hz)、丙氨酸(δ＝1.49±0.02,d,J＝7.2Hz)、精氨酸(δ＝1.75±0.02,m)、乙酸(δ＝1.93±0.02,s)、脯氨酸(δ＝4.13±0.02,dd,J＝8.7Hz,6.0Hz)、琥珀酸(δ＝2.46±0.02,s)、谷氨酸(δ＝2.05±0.02,m)、谷氨酰胺(δ＝2.40±0.02,m)、二甲基甘氨酸(δ＝2.90±0.02,s)、膽堿(δ＝3.21±0.02,s)、磷脂酰膽堿(δ＝3.23±0.02,s)、氧化三甲胺(δ＝3.27±0.02,s)、甘油酯(δ＝3.62±0.02,dd,J＝4.8Hz,11.4Hz)、甘氨酸(δ＝3.53±0.02,s)、尿嘧啶(δ＝5.76±0.02,d,J＝7.8Hz)、富馬酸(δ＝6.53±0.02,s)、胞苷(δ＝5.90±0.02,d,J＝4.8Hz)、酪氨酸(δ＝7.18±0.02,d,J＝8.4Hz)、組氨酸(δ＝7.98±0.02,s)、苯丙氨酸(δ＝7.40±0.02,m)、次黃嘌呤(δ＝8.22±0.02,s)、腺苷(δ＝8.35±0.02,s)、甲酸(δ＝8.47±0.02,s)、AMP(δ＝8.56±0.02,s)、煙酰胺(δ＝8.97±0.02,dd,J＝0.6Hz,2.4Hz)。

8.一種地龍1H NMR指紋圖譜的應用，其特征在于：應用于對地龍飲片質量的控制。

9.一種地龍1H NMR指紋圖譜的應用方法，其特征在于：對不同批次地龍飲片的1H NMR圖譜數據進行分段積分，通過多元統計分析方法，結合指認化學物質積分數據的半定量分析，比較不同批次地龍飲片藥材質量，從而控制地龍飲片的質量。