[發(fā)明專利]一種離子液體對(duì)糖代謝影響的評(píng)估方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010129284.X
• 申請(qǐng)日: 2020-02-28
• 公開（公告）號(hào): CN111235208B
• 公開（公告）日: 2022-10-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周磊;薛永來;崔雯;何錦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/02
• 分類號(hào): C12Q1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種離子液體對(duì)糖代謝影響的評(píng)估方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

（1）HepG2細(xì)胞培養(yǎng)至貼壁后，換液至暴露溶液中初次暴露培養(yǎng)；

（2）測(cè)定初次暴露后HepG2細(xì)胞的存活率和暴露前后培養(yǎng)基中葡萄糖的消耗量，取存活率較高且對(duì)葡萄糖消耗量影響較大的處理組進(jìn)行第二次暴露培養(yǎng)；

（3）對(duì)步驟（2）中第二次暴露培養(yǎng)后的HepG2細(xì)胞進(jìn)行糖原含量、糖代謝相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)；

（4）對(duì)步驟（3）中的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，分析暴露試驗(yàn)后HepG2細(xì)胞糖代謝受到的影響，評(píng)估不同暴露濃度對(duì)糖代謝的毒性影響；步驟（3）中所述的糖代謝相關(guān)基因?yàn)镚LUT1、PYGL、GSK3β、GYS2、PKM、PFKFB3、IDH2、PDK1和/或LDHA中的一種或多種；所述暴露溶液為1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述暴露溶液的濃度為0~32mM。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的暴露溶液的溶劑為暴露培養(yǎng)基，所述的暴露培養(yǎng)基以體積百分比計(jì)，每份暴露培養(yǎng)基中含有0.2%的牛血清白蛋白、1%的鏈霉素、1%的青霉素以及97.8%的DMEM高糖培養(yǎng)基。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的初次暴露培養(yǎng)條件為37℃，含有5%CO₂的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的第二次暴露培養(yǎng)條件與初次暴露培養(yǎng)相同。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（4）中所述的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析為使用IBMSPSS Statistic 19對(duì)步驟（3）中數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。