[發明專利]適于生物分子多重檢測的檢測顆粒及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202010129075.5
• 申請日: 2020-02-25
• 公開（公告）號: CN113376146A
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 郭慶生;徐宏;古宏晨
• 申請（專利權）人: 上海交通大學;上海邁景納米科技有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 朱凌嬌;許亦琳

本發明提供一種適于生物分子多重檢測的檢測顆粒，包括帶有編碼功能的微載體，所述微載體連接有檢測微粒，所述檢測微粒適用于進行光激化學發光檢測。本發明首次制備了集編碼鑒別、磁分離、光激化學發光檢測功能于一體的多功能檢測顆粒。首次搭建了用于多功能檢測顆粒的成像檢測分析裝置。提供的適于生物分子多重檢測的檢測顆粒能夠實現高靈敏、快速、免洗的多重檢測方法，大大擴展了單反應可以檢測的生物分子的數量，且可以做到全流程無需洗滌去除未反應的信號標記分子，簡化實驗步驟，提高檢測效率。該方法適用于蛋白、核酸、小分子的檢測。

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，特別是涉及一種適于生物分子多重檢測的檢測顆粒及其制備方法與應用。

背景技術

生物分子檢測，特別是基于抗原-抗體識別的免疫檢測和基于堿基互補配對的核酸檢測，在疾病診斷、藥物開發、基礎生物科學研究等領域發揮著重要的作用。酶聯免疫吸附反應(ELISA)技術因其高靈敏度和高特異性的優點，已經成為免疫檢測的金標準技術。然而目前ELISA還存在兩大挑戰。一方面，典型的ELISA檢測流程需要反復的分離和洗滌步驟來去除可能帶來背景信號的未結合的分子。這使得該分析方法不但復雜、耗時，且多步操作會帶來累積錯誤。所以發展一種便捷、易用的免疫分析方法將更能滿足現場快速檢測的需求。光激化學發光技術利用光激發后產生的單線態氧在兩種微粒間的傳遞而產生的化學發光信號來檢測待分析物，避免了傳統ELISA所需的反復洗滌的步驟。但是光激化學發光技術缺乏單反應多重檢測的能力。另一方面，往往有多種標志物與一種疾病相關，因此對這些標志物分子進行單反應多重檢測能更準確、更靈敏、有效地進行診斷。編碼微球技術利用具有唯一編碼特征的微球作為反應單元來鑒別特定的靶標分子，能夠實現對多重待測物在一個反應管中同時檢測，但是和ELISA一樣需要多步分離和繁瑣的洗滌步驟，難以適應現場快速檢測等應用場景的需求。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種適于生物分子多重檢測的檢測顆粒及其制備方法與應用。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明第一方面提供一種適于生物分子多重檢測的檢測顆粒，包括帶有編碼功能的微載體，所述微載體連接有檢測微粒，所述檢測微粒適用于進行光激化學發光檢測。

本發明第二方面提供一種生物分子檢測系統，用于同時檢測多種生物分子，至少包括多個前述的適于生物分子多重檢測的檢測顆粒，以及匹配微粒，所述匹配微粒是指與所述檢測顆粒中檢測微粒匹配的光激化學發光微粒。

本發明第三方面提供一種適于生物分子多重檢測的檢測顆粒的制備方法，包括以下步驟：

將帶有編碼功能的微載體和含有檢測微粒的分散液混合，避光反應，得到所述適于生物分子多重檢測的檢測顆粒。

本發明第四方面提供前述適于生物分子多重檢測的檢測顆粒或生物分子檢測系統在生物分子檢測中的應用。

本發明第五方面提供一種生物分子檢測方法，包括如下步驟：

(1)將適于生物分子多重檢測的檢測顆粒和待測樣本溶液混合，孵育；

(2)加入匹配微粒，孵育；

(3)將步驟(2)得到的混合物置于帶有照相或攝像功能的熒光顯微鏡中進行檢測，激發帶有編碼功能的微載體信號和光激化學發光信號；

(4)分別對帶有編碼功能的微載體信號和光激化學發光信號進行采集，將帶有編碼功能的微載體信號激發后獲得的圖像與光激化學發光信號激發后獲得的圖像進行匹配。

如上所述，本發明的一種適于生物分子多重檢測的檢測顆粒及其制備方法與應用，具有以下有益效果：