[發明專利]一種手性氨基醇類化合物的合成方法

在審

• 申請號: 202010127746.4
• 申請日: 2020-02-28
• 公開（公告）號: CN113322291A
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 彭要武;田文敬;葉青;胡磊;方志成
• 申請（專利權）人: 湖北美天生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P17/10
• 分類號: C12P17/10;C12N9/04;C12N15/53
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 王衛彬;蔡立豐

本發明公開了一種手性氨基醇類化合物的合成方法。本發明提供的手性氨基醇類化合物的合成方法其包括以下步驟：有機溶劑和緩沖溶液中，在羰基還原酶和輔酶存在下，將如式II所示的羰基化合物進行如下所示的還原反應，得到含如式I所示的手性氨基醇類化合物的轉化液即可；所述的羰基還原酶來自圓紅酵母(Rhodotorula toruloides)的羰基還原酶；其中，R¹為(S)?1?苯乙基和/或(R)?1?苯乙基。本發明中以消旋的氮雜丙啶手性化合物為起始原料，經過重組羰基還原酶的酶法反應，高效的合成單一構型的手性氨基醇，得到高de值的重要中間體，有利降低生產成本。

技術領域

本發明涉及一種手性氨基醇類化合物的合成方法。

背景技術

氟苯尼考(Florfenicol)，是由美國先靈-保雅(Schering-Plough)公司Nagab-hushan等在20世紀70年代末研制開發的一種動物專用的氯霉素類廣譜抗生素。鑒于在動物疾病防治上，氟苯尼考的藥效優于氯霉素和甲砜霉素，因此具有更為廣闊的應用前景，氟苯尼考的合成一直都受到了很大的重視。

近年來利用酶法還原進行合成手性化合物的研究比較廣泛，我公司在氟苯尼考新工藝開發過程中發明了兩篇中國專利，CN102827042A和CN103936638A，其中在專利CN103936638A中有一個非常重要的中間體單一構型的手性氨基醇，是通過化學方法合成的，需要化學拆分與手性還原。，效率低。

專利CN103936638A中合成路線如下：

專利CN106316898B中公開了合成路線如下：

上述方法是通過不同的還原試劑得到不同構型的手性氨基醇，手性氨基羰基都是通過化學拆分所得，需要反復重結晶得到單一構型的手性氨基羰基化合物。

發明內容

本發明所要解決的問題就是克服現有技術中氟苯尼考關鍵中間體手性氨基醇的制備方法單一的缺陷，而提供了一種手性氨基醇類化合物的生物合成方法；該方法通過一種微生物/酶催化的技術，利用非手性前體及生物催化合成體系，經生物催化與轉化的方法制備得到單一手性氨基醇類化合物。該方法所用的生物催化合成體系具有高效、低成本、無污染的特點；具有較高效率，較高收率，成本低，有很高的商業應用價值。

本發明是通過下述技術方案來解決上述技術問題的。

本發明提供了一種手性氨基醇類化合物的合成方法，包括以下步驟：在有機溶劑和緩沖溶液中，在羰基還原酶和輔酶體系存在下，將如式II所示的羰基化合物進行如下所示的還原反應，得到含如式I所示的手性氨基醇類化合物的轉化液即可；所述的羰基還原酶來自圓紅酵母(Rhodotorula toruloides)的羰基還原酶；

其中，R¹為(S)-1-苯乙基和/或(R)-1-苯乙基；

*表示手性碳，其為S構型或S構型和R構型的混合物。

在本發明的某一方案中，所述的來自圓紅酵母(Rhodotorula toruloides)的羰基還原酶(保藏號CGMCC 2.1389)選自下組：

(i)其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；

和/或，(ii)對SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在保持酶活性范圍內，進行一個或多個氨基酸的替換、缺失、改變、插入或增加，所得到的氨基酸序列，例如，與如SEQ ID NO.1所示同源性為95％以上的氨基酸序列。

在本發明的某一方案中，所述的羰基還原酶的編碼基因序列選自下組：

(a)SEQ ID NO.2所示的序列；