[發明專利]促進糖尿病潰瘍創面愈合的三維復合海綿狀結構體及方法

有效

• 申請號: 202010125425.0
• 申請日: 2020-02-27
• 公開（公告）號: CN111317855B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 趙應征;魯翠濤;肖健;徐荷林;姚情;王麗芬;羅蘭子
• 申請（專利權）人: 溫州醫科大學
• 主分類號: A61L15/42
• 分類號: A61L15/42;A61L15/32;A61L15/44;A61L15/46;A61L15/40;A61L15/28;A61L15/18;A61L15/26;A61F13/02
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369
• 代理人: 卞靜靜

1.一種促進糖尿病潰瘍創面愈合的三維復合海綿狀結構體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一、取肝素-泊洛沙姆聚合物凝膠和細胞生長因子混勻，于模具中進行第一冷凍干燥，并制備得到A層海綿狀結構；

步驟二、取殼聚糖及其衍生物粉末分散于硝酸中進行氨基質子化反應，之后加入1,2-丙二醇混勻，再加入硝酸銀，混勻，于模具中進行第二冷凍干燥，并制備得到B層海綿狀結構；

步驟三、取脫細胞真皮支架在液氮中進行粉碎，于模具中進行第三冷凍干燥，并制備得到C層海綿狀結構；

步驟四、將步驟一中得到的A層海綿狀結構、步驟二中得到的B層海綿狀結構和步驟三中的C層海綿狀結構按照A-B-C的次序依次疊放在一起，滅菌后得到三維復合海綿狀結構體；

進行所述第一冷凍干燥的具體方法包括：首先于溫度-20~-30℃下冷凍3~4小時，之后于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa，然后于體積比80~90%的乙醇溶液熏蒸和紫外線下交聯1~3h，最后再次于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa；

進行所述第二冷凍干燥的具體方法包括：首先于溫度-35~-45℃下冷凍3~4小時，之后于溫度-45~-85℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa，然后于體積比80~90%的乙醇溶液熏蒸和紫外線下交聯3~5 h，最后再次于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa；

進行所述第三冷凍干燥的具體方法包括：首先于溫度-30~-40℃下冷凍3~4小時，之后于溫度-40~-80℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10 Pa，然后于體積比80~90%的乙醇溶液熏蒸和紫外線下交聯1~3h，最后再次于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa；

所述促進糖尿病潰瘍創面愈合的三維復合海綿狀結構體由靠近潰瘍創面向外的方向上依次設置有A層海綿狀結構、B層海綿狀結構和C層海綿狀結構，其中，所述A層海綿狀結構包含負載細胞生長因子的肝素-泊洛沙姆聚合物凝膠，所述B層海綿狀結構包含負載納米銀的殼聚糖及其衍生物的凝膠，所述C層海綿狀結構包含脫細胞真皮支架和表皮干細胞，所述表皮干細胞鋪滿所述脫細胞真皮支架表面積的80%以上；所述細胞生長因子選自轉化生長因子、胰島素樣生長因子、角質細胞生長因子、表皮生長因子、血管內皮生長因子、神經生長因子中的任意一種或幾種；所述殼聚糖衍生物包括N-三甲基殼聚糖、N-馬來酰化殼聚糖、羧甲基殼聚糖、N,O-羧甲基殼聚糖和羥丙基殼聚糖中的任意一種或幾種；所述A層海綿狀結構中細胞生長因子的質量百分含量為0.001%～0.1%，所述B層海綿狀結構中納米銀的質量百分含量為0.0001%～0.01%。

2. 如權利要求1所述的促進糖尿病潰瘍創面愈合的三維復合海綿狀結構體的制備方法，其特征在于，步驟一、步驟二和步驟三中，首先將模具內表面加熱至50~60℃，之后再將組分加入到模具中，并于50~60 rpm下振動25~35min后，之后進行冷凍干燥。

3.如權利要求1所述的促進糖尿病潰瘍創面愈合的三維復合海綿狀結構體的制備方法，其特征在于，步驟一、步驟二和步驟三中，制備海綿狀結構時，各組分還分別加入有保濕劑、穩定劑、抑菌劑和pH調節劑。