[發(fā)明專利]促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的三維復(fù)合海綿狀結(jié)構(gòu)體及方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010125425.0
• 申請日: 2020-02-27
• 公開（公告）號: CN111317855B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙應(yīng)征;魯翠濤;肖健;徐荷林;姚情;王麗芬;羅蘭子
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: A61L15/42
• 分類號: A61L15/42;A61L15/32;A61L15/44;A61L15/46;A61L15/40;A61L15/28;A61L15/18;A61L15/26;A61F13/02
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11369
• 代理人: 卞靜靜

1.一種促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的三維復(fù)合海綿狀結(jié)構(gòu)體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟一、取肝素-泊洛沙姆聚合物凝膠和細(xì)胞生長因子混勻，于模具中進(jìn)行第一冷凍干燥，并制備得到A層海綿狀結(jié)構(gòu)；

步驟二、取殼聚糖及其衍生物粉末分散于硝酸中進(jìn)行氨基質(zhì)子化反應(yīng)，之后加入1,2-丙二醇混勻，再加入硝酸銀，混勻，于模具中進(jìn)行第二冷凍干燥，并制備得到B層海綿狀結(jié)構(gòu)；

步驟三、取脫細(xì)胞真皮支架在液氮中進(jìn)行粉碎，于模具中進(jìn)行第三冷凍干燥，并制備得到C層海綿狀結(jié)構(gòu)；

步驟四、將步驟一中得到的A層海綿狀結(jié)構(gòu)、步驟二中得到的B層海綿狀結(jié)構(gòu)和步驟三中的C層海綿狀結(jié)構(gòu)按照A-B-C的次序依次疊放在一起，滅菌后得到三維復(fù)合海綿狀結(jié)構(gòu)體；

進(jìn)行所述第一冷凍干燥的具體方法包括：首先于溫度-20~-30℃下冷凍3~4小時，之后于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa，然后于體積比80~90%的乙醇溶液熏蒸和紫外線下交聯(lián)1~3h，最后再次于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa；

進(jìn)行所述第二冷凍干燥的具體方法包括：首先于溫度-35~-45℃下冷凍3~4小時，之后于溫度-45~-85℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa，然后于體積比80~90%的乙醇溶液熏蒸和紫外線下交聯(lián)3~5 h，最后再次于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa；

進(jìn)行所述第三冷凍干燥的具體方法包括：首先于溫度-30~-40℃下冷凍3~4小時，之后于溫度-40~-80℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10 Pa，然后于體積比80~90%的乙醇溶液熏蒸和紫外線下交聯(lián)1~3h，最后再次于溫度-35~-75℃冷凍干燥24～48 h，冷凍干燥時的真空度小于10Pa；

所述促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的三維復(fù)合海綿狀結(jié)構(gòu)體由靠近潰瘍創(chuàng)面向外的方向上依次設(shè)置有A層海綿狀結(jié)構(gòu)、B層海綿狀結(jié)構(gòu)和C層海綿狀結(jié)構(gòu)，其中，所述A層海綿狀結(jié)構(gòu)包含負(fù)載細(xì)胞生長因子的肝素-泊洛沙姆聚合物凝膠，所述B層海綿狀結(jié)構(gòu)包含負(fù)載納米銀的殼聚糖及其衍生物的凝膠，所述C層海綿狀結(jié)構(gòu)包含脫細(xì)胞真皮支架和表皮干細(xì)胞，所述表皮干細(xì)胞鋪滿所述脫細(xì)胞真皮支架表面積的80%以上；所述細(xì)胞生長因子選自轉(zhuǎn)化生長因子、胰島素樣生長因子、角質(zhì)細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、神經(jīng)生長因子中的任意一種或幾種；所述殼聚糖衍生物包括N-三甲基殼聚糖、N-馬來酰化殼聚糖、羧甲基殼聚糖、N,O-羧甲基殼聚糖和羥丙基殼聚糖中的任意一種或幾種；所述A層海綿狀結(jié)構(gòu)中細(xì)胞生長因子的質(zhì)量百分含量為0.001%～0.1%，所述B層海綿狀結(jié)構(gòu)中納米銀的質(zhì)量百分含量為0.0001%～0.01%。

2. 如權(quán)利要求1所述的促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的三維復(fù)合海綿狀結(jié)構(gòu)體的制備方法，其特征在于，步驟一、步驟二和步驟三中，首先將模具內(nèi)表面加熱至50~60℃，之后再將組分加入到模具中，并于50~60 rpm下振動25~35min后，之后進(jìn)行冷凍干燥。

3.如權(quán)利要求1所述的促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的三維復(fù)合海綿狀結(jié)構(gòu)體的制備方法，其特征在于，步驟一、步驟二和步驟三中，制備海綿狀結(jié)構(gòu)時，各組分還分別加入有保濕劑、穩(wěn)定劑、抑菌劑和pH調(diào)節(jié)劑。