[發明專利]一種基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型的構建方法及雷帕霉素類藥物的應用

有效

• 申請號: 202010125422.7
• 申請日: 2020-02-27
• 公開（公告）號: CN111264469B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 王悅;施秉銀;張萌;伍麗萍
• 申請（專利權）人: 西安交通大學醫學院第一附屬醫院
• 主分類號: C12N15/33
• 分類號: C12N15/33
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 范巍

1.一種基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將表達人促甲狀腺激素受體的腺病毒的母液按照1：50的體積比用PBS稀釋，得到Ad-TSHR稀釋液；

所述表達人促甲狀腺激素受體的腺病毒的母液的濃度≥10¹⁰pfu/ml，表達人促甲狀腺激素受體的腺病毒母液按照1：50的體積比例用PBS稀釋得到；

2)在第0周的第1天，給實驗動物左、右臀大肌分別注射25uL的Ad-TSHR稀釋液；

3)在第3、6、10、14、18、22、26、30周均重復步驟2)的操作，直至誘發實驗動物產生甲狀腺相關性眼病，在第34周對實驗動物的離體眶骨進行病理學觀察，小鼠眼眶球后纖維化體積增大，球后脂肪沉積增多，出現球后組織淋巴細胞浸潤，個別小鼠出現眼球的突出、球結膜紅腫及眼瞼增生增厚，即成功構建基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型。

2.根據權利要求1所述的基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型的構建方法，其特征在于，所述表達人促甲狀腺激素受體的腺病毒所表達的人促甲狀腺激素受體cDNA為TSHR289片段，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。

3.根據權利要求1所述的基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型的構建方法，其特征在于，所述實驗動物為具有免疫活性的嚙齒類動物。

4.根據權利要求3所述的基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型的構建方法，其特征在于，所述嚙齒類動物為小鼠。

5.根據權利要求4所述的基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病動物模型的構建方法，其特征在于，所述小鼠為6～8周雌性BALB/C小鼠。

6.雷帕霉素類藥物作為治療權利要求1～5中任意一項所述的構建方法構建得到的基因免疫誘導的甲狀腺相關性眼病的應用。

7.如權利要求6所述的應用，其特征在于，雷帕霉素類藥物為雷帕霉素、雷帕霉素藥學上可接受的鹽、雷帕霉素衍生物或雷帕霉素衍生物藥學上可接受的鹽。

8.如權利要求6所述的應用，其特征在于，雷帕霉素類藥物為胃腸道給藥和胃腸道外給藥中的任一臨床上可接受的劑型。