[發(fā)明專利]一種復(fù)合前列腺特異性抗原試劑盒及其使用方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010124957.2
• 申請(qǐng)日: 2020-02-27
• 公開（公告）號(hào): CN111175487A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 江川;劉振世;吳曉瑜;林潔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇澤成生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/533
• 分類號(hào): G01N33/533;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 上海聯(lián)科律師事務(wù)所 31350
• 代理人: 趙旭

本發(fā)明公開了醫(yī)學(xué)檢測(cè)試劑相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域的一種復(fù)合前列腺特異性抗原試劑盒及其使用方法，包括c?PSA校準(zhǔn)品、c?PSA質(zhì)控品、c?PSA預(yù)處理液、c?PSA抗試劑、磁微粒試劑、化學(xué)發(fā)光底物液和清洗液，c?PSA校準(zhǔn)品通過c?PSA抗原與第一緩沖液充分混合制備而成；c?PSA預(yù)處理液通過游離前列腺特異性抗原抗體與第二緩沖液充分混合制備而成；c?PSA抗試劑通過堿性磷酸酶標(biāo)記的PSA單克隆抗體和異硫氰酸熒光素標(biāo)記的PSA單克隆抗體，添加至第二緩沖液充分混合制備而成；磁微粒試劑通過第三緩沖液將羊抗異硫氰酸熒光素抗體標(biāo)記的磁微粒稀釋并充分混合制備而成；化學(xué)發(fā)光底物液通過第四緩沖液將APLS避光稀釋并充分混合制備而成；清洗液通過純化水將第五緩沖液稀釋制備而成；結(jié)果靈敏，使用方便。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測(cè)試劑相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種復(fù)合前列腺特異性抗原試劑盒及其使用方法。

背景技術(shù)

前列腺特異性抗原(PSA)，是一種具有組織特異性的糜蛋白酶樣的絲氨酸蛋白酶，由前列腺上皮細(xì)胞合成分泌至精液中。血清中PSA主要以游離態(tài)(F-PSA)和結(jié)合態(tài)(c-PSA)兩種形式存在，后者包括ACT-PSA和α2M-PSA(不具備免疫反應(yīng)活性)。因此在臨床上檢測(cè)的T-PSA通常為F-PSA和ACT-PSA。在健康男性體內(nèi)，只有很少量的PSA會(huì)進(jìn)滲漏到循環(huán)血中，血清中的PSA濃度通常都不足精漿的百萬分之一；在前列腺疾病中，由于PSA滲漏增加或者異常分泌至循環(huán)血中，因而通常PSA的血清水平會(huì)升高。

前列腺癌(PC)和前列腺增生(BPH)是男性常見的前列腺疾病。近年來，PC的患病率呈增長趨勢(shì)。前列腺抗原是前列腺癌監(jiān)測(cè)和評(píng)估的較具有臨床價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，然而PSA屬器官特異性抗原，而非前列腺癌特異。BPH和PC的PSA水平在4-10ng/ml時(shí)有較大部分重疊，因此很難根據(jù)PSA水平將二者區(qū)分。目前，F(xiàn)-PSA/T-PSA被廣泛應(yīng)用于PC診斷，但由于F-PSA含量較低且不穩(wěn)定帶來比率誤差，影響診斷特異性。研究發(fā)現(xiàn)前列腺疾病患者血清內(nèi)PSA大多數(shù)與絲氨酸酶的抑制物α1抗胰凝乳蛋白酶(ACT)形成復(fù)合物。PC患者血清ACT-PSA的比例比BPH患者高，ACT-PSA/PSA比值是診斷前列腺癌更靈敏的指標(biāo)。通過PC與BPH患者的臨床數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，T-PSA無顯著性差異，而c-PSA則有顯著性差異，對(duì)于PC檢測(cè)，c-PSA特異性明顯高于T-PSA，穩(wěn)定性優(yōu)于F-PSA。

由于F-PSA含量低、測(cè)試不穩(wěn)定而導(dǎo)致的比值誤差，多數(shù)的BPH患者需要進(jìn)行活檢，才能避免PC患者被漏檢或誤診，不僅操作不方便，還容易給患者造成痛苦。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在前述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種復(fù)合前列腺特異性抗原試劑盒及其使用方法。

本發(fā)明提供的復(fù)合前列腺特異性抗原試劑盒引入的測(cè)定方法，是在磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫分析平臺(tái)基礎(chǔ)上進(jìn)行開發(fā)的，通過抗原抗體間的免疫反應(yīng)去除待測(cè)物中游離前列腺特異性抗原，隨后用特異性抗體結(jié)合待測(cè)物中的復(fù)合前列腺特異性抗原，與磁微粒試劑結(jié)合后在磁場(chǎng)條件下分離，結(jié)合物通過酶促發(fā)光反應(yīng)，在化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀中進(jìn)行發(fā)光強(qiáng)度測(cè)定。通過濃度與發(fā)光強(qiáng)度劑量曲線，計(jì)算該發(fā)光強(qiáng)度對(duì)應(yīng)的復(fù)合前列腺特異性抗原含量。

一種復(fù)合前列腺特異性抗原試劑盒，包括c-PSA校準(zhǔn)品、c-PSA質(zhì)控品、c-PSA預(yù)處理液、c-PSA抗試劑、磁微粒試劑、化學(xué)發(fā)光底物液和清洗液，所述c-PSA校準(zhǔn)品、所述c-PSA質(zhì)控品、所述c-PSA預(yù)處理液、所述c-PSA抗試劑、所述磁微粒試劑、所述化學(xué)發(fā)光底物液和所述清洗液分別獨(dú)立包裝；

所述c-PSA校準(zhǔn)品通過c-PSA抗原與第一緩沖液充分混合制備而成；

所述c-PSA預(yù)處理液通過游離前列腺特異性抗原抗體與第二緩沖液充分混合制備而成；

所述c-PSA抗試劑通過堿性磷酸酶標(biāo)記的PSA單克隆抗體和異硫氰酸熒光素標(biāo)記的PSA單克隆抗體，添加至所述第二緩沖液充分混合制備而成；