[發(fā)明專利]一種提高乳酸菌谷胱甘肽過氧化物酶酶活的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010124580.0 | 申請(qǐng)日： | 2020-02-27 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111235060A | 公開（公告）日： | 2020-06-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 徐穎;賀佳璇;許牡丹;張婷;緱敬軒 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 陜西科技大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N1/20 | 分類號(hào)： | C12N1/20;C12N1/38;C12R1/225;C12R1/245;C12R1/46;C12R1/25;C12R1/23 |
| 代理公司： | 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200 | 代理人： | 馬貴香 |
| 地址： | 710021*** | 國(guó)省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 提高 乳酸菌 谷胱甘肽 過氧化物 酶酶活 方法 | ||
本發(fā)明提供一種提高乳酸菌谷胱甘肽過氧化物酶酶活的方法，包括以下步驟：步驟1，對(duì)乳酸菌進(jìn)行活化培養(yǎng)，得到乳酸菌菌液；步驟2，將乳酸菌菌液接種至含亞硒酸鈉的液體培養(yǎng)基中，經(jīng)過鹽脅迫或熱脅迫富硒培養(yǎng)。本發(fā)明使用亞硒酸鈉對(duì)乳酸菌進(jìn)行富硒培養(yǎng)，乳酸菌在經(jīng)過鹽脅迫或熱脅迫富硒培養(yǎng)后，乳酸菌中谷胱甘肽過氧化物酶酶活得到提高。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及谷胱甘肽過氧化物酶，具體為一種提高乳酸菌谷胱甘肽過氧化物酶酶活的方法。
背景技術(shù)
谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-Px)，是生物體內(nèi)一種重要的含硒過氧化物分解酶。GSH-Px的活性中心是硒代半胱氨酸，主要作用是與維生素等協(xié)同作用，保護(hù)細(xì)胞免受過氧化物的損傷、清除體內(nèi)有害的自由基，是細(xì)胞內(nèi)抗過氧化物作用的酶促保護(hù)系統(tǒng)重要組成成分。GSH-Px能催化還原型谷胱甘肽(GSH)變?yōu)檠趸凸入赘孰?GSSG)，使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物，同時(shí)促進(jìn)H2O2的分解，從而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能不受過氧化物的干擾及損害。GSH-Px主要包括4種：分別為胞漿GSH-Px、血漿GSH-Px、磷脂氫過氧化物GSH-Px及胃腸道專屬性GSH-Px。
但是，目前現(xiàn)有的谷胱甘肽過氧化物酶的酶活普遍較低，因此，提高谷胱甘肽過氧化物酶活性具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供一種提高乳酸菌谷胱甘肽過氧化物酶酶活的方法。該方法簡(jiǎn)單易行、效果顯著，解決了現(xiàn)有的谷胱甘肽過氧化物酶的酶活普遍較低的問題。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：
一種提高乳酸菌谷胱甘肽過氧化物酶酶活的方法，包括以下步驟：
步驟1，對(duì)乳酸菌進(jìn)行活化培養(yǎng)，得到乳酸菌菌液；
步驟2，將乳酸菌菌液接種至含亞硒酸鈉的液體培養(yǎng)基中，在37℃恒溫靜置培養(yǎng)。
優(yōu)選的，步驟2中，含亞硒酸鈉的液體培養(yǎng)基中亞硒酸鈉的濃度為20-160μg/mL。
優(yōu)選的，步驟2中，液體培養(yǎng)基中還含有NaCl。
進(jìn)一步的，液體培養(yǎng)基中NaCl的質(zhì)量濃度為0.4％-0.9％。
優(yōu)選的，步驟2中，先將乳酸菌菌液接種于MRS液體培養(yǎng)基，于37℃恒溫培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期后，進(jìn)行熱脅迫處理，然后再向MRS液體培養(yǎng)基中加入亞硒酸鈉溶液，在37℃恒溫靜置培養(yǎng)。
進(jìn)一步的，熱脅迫處理的溫度為45-55℃。
優(yōu)選的，步驟1具體為：將經(jīng)高溫高壓滅菌后的MRS肉湯培養(yǎng)基注入乳酸菌凍干管中，用移液槍吹打，使乳酸菌充分溶解成菌懸液；將菌懸液在菌種規(guī)定條件下培養(yǎng)，活化成功后，將菌株接種到MRS肉湯培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中靜置37℃下培養(yǎng)，連續(xù)活化三代。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果：
本發(fā)明使用亞硒酸鈉對(duì)乳酸菌進(jìn)行富硒培養(yǎng)，測(cè)定谷胱甘肽過氧化物酶酶活，通過研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌在經(jīng)過富硒培養(yǎng)后，乳酸菌中谷胱甘肽過氧化物酶酶活得到提高，其中部分菌株鼠李糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌和嗜酸乳桿菌的GSH-Px活性有顯著提高。這可能是因?yàn)镾e是GSH-Px的催化位點(diǎn)中的硒代半胱氨酸合成的必要元素，硒元素的增補(bǔ)可使硒代半胱氨酸的表達(dá)量增加，從而增強(qiáng)了GSH-Px酶活性。
進(jìn)一步的，通過鹽脅迫配合富硒培養(yǎng)，進(jìn)一步的提高了乳酸菌中谷胱甘肽過氧化物酶酶活，可能是因?yàn)橐欢康柠}濃度可以促進(jìn)乳酸菌富硒。
進(jìn)一步的，通過熱脅迫富硒培養(yǎng)，進(jìn)一步的提高了乳酸菌胞內(nèi)GSH-Px活性，熱脅迫可能使乳酸菌誘導(dǎo)產(chǎn)生熱休克蛋白，使得部分酶活力增加。
附圖說明
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