[發(fā)明專(zhuān)利]一種腸道厭氧微生物培養(yǎng)瓶及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010121809.5
• 申請(qǐng)日: 2020-02-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111363671B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周開(kāi)臣;楊柳;王荃;姚智
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 天津醫(yī)科大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C12M1/24;C12N1/04
• 代理公司: 天津才智專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 12108
• 代理人: 王夢(mèng)

1.一種腸道厭氧微生物培養(yǎng)瓶，其特征在于，包括密封封裝的培養(yǎng)瓶和灌裝在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液；其中，培養(yǎng)液包括由以體積份計(jì)的100份基礎(chǔ)培養(yǎng)基水溶液、4份2.5wt.％的L-半胱氨酸鹽水溶液和0.1份0.1wt.％的刃天青水溶液混合得到的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，以及體積份數(shù)為基礎(chǔ)培養(yǎng)液的4％的活性添加劑混合液配制而成；活性添加劑混合液由以體積份計(jì)的10份1640培基液、1份BI血清、1份維生素K和1份氯化血紅素混合而成；其中，基礎(chǔ)培養(yǎng)基為粉末狀的RAM基礎(chǔ)培養(yǎng)基、CDC基礎(chǔ)培養(yǎng)基、RCM基礎(chǔ)培養(yǎng)基或MRS基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸道厭氧微生物培養(yǎng)瓶，其特征在于，培養(yǎng)液的灌裝體積為培養(yǎng)瓶容積的90％～95％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸道厭氧微生物培養(yǎng)瓶，其特征在于，培養(yǎng)瓶由西林瓶、插裝在西林瓶瓶口處的橡膠膠塞、封裝在橡膠膠塞和西林瓶瓶口端部的中空鋁蓋、以及蓋裝在中空鋁蓋上的頂蓋。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腸道厭氧微生物培養(yǎng)瓶，其特征在于，西林瓶采用硼硅玻璃瓶；頂蓋采用聚四氟乙烯頂蓋。

5.一種腸道厭氧微生物培養(yǎng)瓶的制備方法，其特征在于，制備方法如下：

S1、將粉末狀的基礎(chǔ)培養(yǎng)基按比例溶解在無(wú)菌水中配制得到基礎(chǔ)培養(yǎng)基溶液；將粉末狀刃天青溶解在無(wú)菌水中配制得到0.1wt.％的刃天青水溶液；將粉末狀L-半胱氨酸鹽溶解在無(wú)菌水中配制得到2.5wt.％的L-半胱氨酸鹽水溶液；

S2、將基礎(chǔ)培養(yǎng)基溶液、L-半胱氨酸鹽水溶液和刃天青水溶液按照體積比為1000:40:1混合得到基礎(chǔ)培養(yǎng)液，分別灌裝至若干個(gè)培養(yǎng)瓶中，并將完成灌裝的培養(yǎng)瓶進(jìn)行密封封裝；其中，灌裝體積為培養(yǎng)瓶容積的90％～95％；

S3、對(duì)經(jīng)過(guò)步驟S2完成灌裝和密封的培養(yǎng)瓶進(jìn)行高壓滅菌；

S4、將1640培基液、BI血清、維生素K和氯化血紅素按照10:1:1:1的體積比混合配制得到活性添加劑混合液，待經(jīng)過(guò)步驟S4高壓滅菌后的培養(yǎng)瓶的溫度降至室溫后，在無(wú)菌操作臺(tái)中將活性添加劑混合液通過(guò)注射器注入至培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；

活性添加劑混合液的注入量與基礎(chǔ)培養(yǎng)液的體積比為1:25。