[發明專利]一種腸道厭氧微生物培養瓶及其制備方法

有效

• 申請號: 202010121809.5
• 申請日: 2020-02-26
• 公開（公告）號: CN111363671B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 周開臣;楊柳;王荃;姚智
• 申請（專利權）人: 天津醫科大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12M1/24;C12N1/04
• 代理公司: 天津才智專利商標代理有限公司 12108
• 代理人: 王夢

1.一種腸道厭氧微生物培養瓶，其特征在于，包括密封封裝的培養瓶和灌裝在培養瓶內的培養液；其中，培養液包括由以體積份計的100份基礎培養基水溶液、4份2.5wt.％的L-半胱氨酸鹽水溶液和0.1份0.1wt.％的刃天青水溶液混合得到的基礎培養液，以及體積份數為基礎培養液的4％的活性添加劑混合液配制而成；活性添加劑混合液由以體積份計的10份1640培基液、1份BI血清、1份維生素K和1份氯化血紅素混合而成；其中，基礎培養基為粉末狀的RAM基礎培養基、CDC基礎培養基、RCM基礎培養基或MRS基礎培養基。

2.根據權利要求1所述的腸道厭氧微生物培養瓶，其特征在于，培養液的灌裝體積為培養瓶容積的90％～95％。

3.根據權利要求1所述的腸道厭氧微生物培養瓶，其特征在于，培養瓶由西林瓶、插裝在西林瓶瓶口處的橡膠膠塞、封裝在橡膠膠塞和西林瓶瓶口端部的中空鋁蓋、以及蓋裝在中空鋁蓋上的頂蓋。

4.根據權利要求1所述的腸道厭氧微生物培養瓶，其特征在于，西林瓶采用硼硅玻璃瓶；頂蓋采用聚四氟乙烯頂蓋。

5.一種腸道厭氧微生物培養瓶的制備方法，其特征在于，制備方法如下：

S1、將粉末狀的基礎培養基按比例溶解在無菌水中配制得到基礎培養基溶液；將粉末狀刃天青溶解在無菌水中配制得到0.1wt.％的刃天青水溶液；將粉末狀L-半胱氨酸鹽溶解在無菌水中配制得到2.5wt.％的L-半胱氨酸鹽水溶液；

S2、將基礎培養基溶液、L-半胱氨酸鹽水溶液和刃天青水溶液按照體積比為1000:40:1混合得到基礎培養液，分別灌裝至若干個培養瓶中，并將完成灌裝的培養瓶進行密封封裝；其中，灌裝體積為培養瓶容積的90％～95％；

S3、對經過步驟S2完成灌裝和密封的培養瓶進行高壓滅菌；

S4、將1640培基液、BI血清、維生素K和氯化血紅素按照10:1:1:1的體積比混合配制得到活性添加劑混合液，待經過步驟S4高壓滅菌后的培養瓶的溫度降至室溫后，在無菌操作臺中將活性添加劑混合液通過注射器注入至培養瓶內；

活性添加劑混合液的注入量與基礎培養液的體積比為1:25。