[發明專利]一種去除C1酯酶抑制劑制備原料中雜蛋白IgM的方法有效
| 申請號： | 202010120179.X | 申請日： | 2020-02-26 |
| 公開（公告）號： | CN111269307B | 公開（公告）日： | 2021-12-21 |
| 發明（設計）人： | 紀德銘;彭焱;詹騫;周志軍;汪菲菲;陳克金;胡勇;李策生 | 申請（專利權）人： | 國藥集團武漢血液制品有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/47 | 分類號： | C07K14/47;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18 |
| 代理公司： | 北京市誠輝律師事務所 11430 | 代理人： | 范盈 |
| 地址： | 430207 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 去除 c1 抑制劑 制備 原料 蛋白 igm 方法 | ||
1.一種去除C1酯酶抑制劑制備原料中雜蛋白IgM的方法，所述C1酯酶抑制劑制備原料來源于血漿，所述方法包括如下步驟：
（1）調整所述C1酯酶抑制劑制備原料的pH為6.8；
（2）向步驟（1）的原料中加入一定量的PEG4000，混勻，所述PEG的用量占C1酯酶抑制劑制備原料的質量分數為12%；
（3）對步驟（2）的混合物離心取上清液，離心條件為15000g，離心時間為10min-60min；
（4）對步驟（3）得到的上清液進行CM離子交換層析，所述離子交換層析中洗脫液的鹽離子濃度為200mM-210mM；
所述的C1酯酶抑制劑制備原料的制備方法包括如下步驟：
1）冷凍血漿復融，使用深層過濾器1~4孔徑濾器過濾；
2）陰離子交換層析：層析柱型號BPG140/500，平衡條件pH 7.0，收集流穿液；
3）親和層析：層析柱型號BPG140/500，樹脂名稱ECH-Lysine Sepharose 4 Fast Flow，平衡條件pH 7.5，收集流穿液；
4）超濾濃縮UF/DF：獲得C1酯酶抑制劑制備原料。
2.權利要求1所述的方法在制備雜蛋白IgM去除率高并且高活性的C1酯酶抑制劑中的應用；其特征在于，與C1酯酶抑制劑制備原料相比，最終得到的C1酯酶抑制劑中的IgM去除率高于99%；C1酯酶抑制劑中的活性C1酯酶抑制劑高于1.0 IU/ml，比活性高于4.0 IU/mg。
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