[發(fā)明專利]一種冠突散囊菌黑色素發(fā)酵制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010120095.6
• 申請(qǐng)日: 2020-02-26
• 公開（公告）號(hào): CN111088300A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張國(guó)廣;費(fèi)鵬;黃冰晴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 閩南師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P17/10
• 分類號(hào): C12P17/10;C12N1/14;C09B67/54;C09B61/00;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供一種冠突散囊菌黑色素發(fā)酵制備方法，從茯磚茶中分離的高產(chǎn)黑色素的冠突散囊菌株發(fā)酵液除去菌絲體后，加入3 mol/L鹽酸使pH=3，低溫下放置4h，黑色素分子自然沉淀出來，離心后收集存留在沉淀中的黑色素，用0.01 mol/L的NaOH溶液溶解黑色素，再次加入3 mol/L鹽酸使pH=3，沉淀黑色素分子，通過3?5次的沉淀和復(fù)溶解過程，黑色素分子得到純化，最后一次的沉淀用超純水洗滌3~5次后，冷凍干燥使得黑色素分子徹底干燥。黑色素分子通過結(jié)構(gòu)表征證實(shí)為真黑色素，進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明冠突散囊菌的黑色素具有一定的降血脂的功效。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物培養(yǎng)與發(fā)酵，具體是一種冠突散囊菌黑色素發(fā)酵制備方法。

背景技術(shù)

黑色素是目前應(yīng)用最多最廣的生物天然色素之一，黑色素主要是由多羥基酚、多羥基吲哚與吡咯氧化而成的構(gòu)造不規(guī)則的化合物，在細(xì)胞中常與蛋白質(zhì)等物質(zhì)結(jié)合存在，微溶或難溶于水，不溶于酸溶液和常見有機(jī)溶劑，可溶于堿溶液。天然黑色素包括兩大類，一類是酪氨酸、多酚化合物經(jīng)生物代謝所得最終產(chǎn)物黑色素(melanin)；另外一大類為花苷類顏色較深的黑色素，主要分布于植物中。根據(jù)黑色素中氮、硫元素的含量，將黑色素分為真黑色素、異黑色素和棕黑色素三類。

從不同生物分離到的黑色素均被報(bào)道具有較強(qiáng)的抗氧化、 清除自由基等功效，且具有延緩衰老、舒氣止脹、清熱解毒、壯陽補(bǔ)腎、軟化血管、抗肥胖、提高免疫力等功效，還可防治各種疾病，如高血壓、心臟病、糖尿病、血管硬化、癌癥及肝臟疾病等。傳統(tǒng)的黑色素合成主要釆用酶法和化學(xué)法，但是由于原料以及酪氨酸酶價(jià)格昂貴，合成流程復(fù)雜，成本較高，不利于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。微生物來源的黑色素因?yàn)槲⑸锏囊着囵B(yǎng)、得率高等特點(diǎn)，逐漸被學(xué)者們挖掘，有許多學(xué)者利用細(xì)菌、霉菌或者真菌生產(chǎn)黑色素，考慮到菌種安全性，大多數(shù)菌株 （如： 大腸桿菌、蘇云金芽孢桿菌等）生產(chǎn)的黑色素在食品中應(yīng)用還有一些障礙。

冠突散囊菌（Eurotium cristatum）又名金花菌，是茯磚茶制作過程中，在特殊的溫度、濕度等環(huán)境調(diào)節(jié)下，通過“發(fā)花”過程而生長(zhǎng)起來的自然的有益的一種真菌。冠突散囊菌自從茯磚茶中分離出后，很多人對(duì)其毒性、生理生化活性和茶葉制作進(jìn)行了研究。多種動(dòng)物中開展的毒理學(xué)研究表明，金花菌屬于無毒微生物，而且其發(fā)酵產(chǎn)物還具有很好的抗氧化、抑菌、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、提高免疫力、抗衰老和抗腫瘤等活性。在培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)冠突散囊菌在液體發(fā)酵中經(jīng)過適當(dāng)處理能產(chǎn)生較高產(chǎn)量的黑色素，該黑色素分子結(jié)構(gòu)與一些大型真菌如黑木耳中黑色素的結(jié)構(gòu)基本一致，且具有很強(qiáng)的抗氧化和降血脂的功能。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種冠突散囊菌黑色素發(fā)酵制備方法。

通過從茯磚茶中分離出的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)黑色素的冠突散囊菌株，通過搖瓶發(fā)酵可產(chǎn)黑色素。提取發(fā)酵液中的黑色素并測(cè)定其含量。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

一種冠突散囊菌黑色素發(fā)酵制備方法，包括以下步驟：將從茯磚茶中分離的高產(chǎn)黑色素的冠突散囊菌株發(fā)酵液除去菌絲體后，加入3 mol/L鹽酸使pH=3，低溫下放置4h，黑色素分子自然沉淀出來，離心后收集存留在沉淀中的黑色素，用0.01 mol/L的NaOH溶液溶解黑色素，再次加入3 mol/L鹽酸使pH=3，沉淀黑色素分子，通過3-5次的沉淀和復(fù)溶解過程，黑色素分子得到純化，最后一次的沉淀用超純水洗滌3~5次后，冷凍干燥使得黑色素分子徹底干燥。黑色素分子通過結(jié)構(gòu)表征證實(shí)為真黑色素，進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明冠突散囊菌的黑色素具有一定的降血脂的功效。