[發(fā)明專利]云杉花墨天牛特異性引物及快速分子檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010118264.2 | 申請日： | 2020-02-26 |
| 公開（公告）號： | CN111235283B | 公開（公告）日： | 2022-04-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 宗世祥;石豐銘;陶靜;焦繼鵬;黃建東 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京林業(yè)大學(xué);北京昌回林海生態(tài)科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京文苑專利代理有限公司 11516 | 代理人： | 王煒 |
| 地址： | 100083 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 云杉 天牛 特異性 引物 快速 分子 檢測 方法 | ||
1.一種用于檢測云杉花墨天牛引物對，其上游引物核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，其下游引物核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：2所示。
2.一種用于檢測云杉花墨天牛的試劑盒，其特征在于，包含權(quán)利要求1所述的引物對。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，還包含PCR緩沖液、dNTP、MgCl2、TaqDNA聚合酶和ddH2O。
4.一種利用權(quán)利要求1所述的引物對檢測云杉花墨天牛的方法，其特征在于，提取待測物的基因組DNA作為模板，以權(quán)利要求1所述的引物對作為擴(kuò)增引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測，若出現(xiàn)394bp的DNA條帶，則檢測為云杉花墨天牛。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)?4℃預(yù)變性2分鐘；94℃變性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共進(jìn)行30個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸2分鐘，置于4℃下保存。
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