[發明專利]新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202010116995.3
• 申請日: 2020-02-25
• 公開（公告）號: CN111187860A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 莫茜;岳敏;陶悅
• 申請（專利權）人: 深圳閃量科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 上海韌辰專利代理有限公司 31331
• 代理人: 劉秋蘭

1.一種新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于所述新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒包括：PCR反應液凍干粉、引物池凍干粉和緩沖液，其中所述引物池凍干粉包括如下引物對和熒光探針：

如SEQ ID NO:1所示的nCoV_N2-F正向引物，如SEQ ID NO:2所示的nCoV_N2-R反向引物，以及如SEQ ID NO:3所示的nCoV_N2-P熒光探針；

如SEQ ID NO:4所示的nCoV_N-F正向引物，如SEQ ID NO:5所示的nCoV_N-R反向引物，以及如SEQ ID NO:6所示的nCoV_N-P熒光探針；

如SEQ ID NO:7所示的nCoV_N3-F正向引物，如SEQ ID NO:8所示的nCoV_N3-R反向引物，以及如SEQ ID NO:9所示的nCoV_N3-P熒光探針；

如SEQ ID NO:10所示的nCoV_ORF1ab-F正向引物，如SEQ ID NO:11所示的nCoV_ORF1ab-R反向引物，以及如SEQ ID NO:12所示的nCoV_ORF1ab-P熒光探針。

2.如權利要求1所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒還具有PCR質控品。

3.如權利要求2所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR質控品由陽性質控品和陰性質控品組成。

4.如權利要求3所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述陽性質控品為質粒假病毒DNA標準品，所述陰性質控品為滅菌后焦碳酸二乙酯處理水。

5.如權利要求4所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述質粒假病毒DNA標準品的序列如SEQ ID NO:13所示。

6.如權利要求1所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液凍干粉包括耐熱DNA聚合酶、二價鎂離子或和三磷酸脫氧核糖核苷酸。

7.如權利要求1所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述緩沖液為pH＝8.0的Tris緩沖液。

8.如權利要求6所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液凍干粉和所述引物池凍干粉用所述緩沖液配置成如下濃度的PCR反應液：耐熱DNA聚合酶的濃度為0.01～1單位/μL優選0.01～0.1單位/μL、二價鎂離子(氯化鎂或硫酸鎂)的濃度為1～4mmol/L優選2.5～3.5mmol/L、三磷酸脫氧核糖核苷酸的濃度為10～500μmol/L優選100～200μmol/L、以及各引物和各熒光探針的濃度分別為10～500nmol/L優選100～200nmol/L。

9.如權利要求8所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液凍干粉和所述引物池凍干粉用所述緩沖液配置成如下濃度的PCR反應液：耐熱DNA聚合酶的濃度為0.05單位/μL、二價鎂離子的濃度為3mmol/L、三磷酸脫氧核糖核苷酸的濃度為200μmol/L、以及各引物和各熒光探針的分別濃度200nmol/L。

10.如權利要求4或5所述的新型冠狀病毒多重PCR快速檢測試劑盒，其特征在于，質粒假病毒DNA標準品的起始濃度為10⁵拷貝/μL。