[發明專利]一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針及制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010114439.2
• 申請日: 2020-02-25
• 公開（公告）號: CN111303119A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 闞偉;杜佳慧;尹浩純;孔祥東;趙冰;李安然;王麗艷;宋波
• 申請（專利權）人: 齊齊哈爾大學
• 主分類號: C07D401/12
• 分類號: C07D401/12;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 王艷萍

1.一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針，其特征在于該探針的結構式為：

2.制備權利要求1所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的方法，其特征在于該方法按以下步驟進行：

將2-(2-羥基-4-氨基苯基)菲并咪唑和吡啶-2-甲醛的物質的量比為1：(1～3)的比例加入到有機溶劑Ⅰ中，在溫度為20～80℃的條件下反應1～5h，反應過程中有固體析出；反應結束后，過濾，依次用有機溶劑Ⅱ和蒸餾水洗滌濾餅，濾餅干燥后得到粗產物；將粗產物用有機溶劑Ⅲ重結晶，得到基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針。

3.根據權利要求2所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的方法，其特征在于所述的有機溶劑Ⅰ為冰醋酸、甲醇、乙醇、N,N-二甲基甲酰胺、苯或甲苯。

4.根據權利要求2或3所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的方法，其特征在于所述的洗滌濾餅的有機溶劑Ⅱ為乙酸乙酯、丙酮、乙醇、二氯甲烷或氯仿。

5.根據權利要求2或3所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的方法，其特征在于所述的粗產物重結晶的有機溶劑Ⅲ為乙酸乙酯，或者是乙酸乙酯和石油醚按體積比為1：(1～5)的混合物，或者是乙酸乙酯和正己烷按體積比為1：(1～5)的混合物，或乙酸乙酯與二氯甲烷按體積比為1：(1～5)的混合物。

6.權利要求1所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的應用，其特征在于該應用是將基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針用于溶液中血藍蛋白的檢測。

7.根據權利要求6所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的應用，其特征在于利用基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針“裸眼”檢測溶液中血藍蛋白的方法，按照以下步驟進行：

一、按基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的濃度為0.5～1mmol/L，將基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針溶解于可與水互溶的有機溶劑中，配置成探針儲備液A；

二、將步驟一得到的探針儲備液A采用濃度為0.01mol/L、pH＝7.40的HEPES溶液稀釋為濃度為0.01～0.05mmol/L的探針溶液B；

三、將步驟二得到探針溶液B與待測溶液充分混合，得到測試溶液C；

四、觀察在自然光下或在365nm的紫外燈下照射下的顏色變化來判斷待測溶液中是否含有血藍蛋白：

在自然光下，探針溶液B為無色，若在自然光下測試溶液C的顏色顯示為淡粉色，則判斷待測溶液中含有血藍蛋白；

在365nm的紫外燈下照射下，探針溶液B為淡黃色，若在365nm的紫外燈下照射下測試溶液C的顏色顯示為綠色，則判斷待測溶液中含有血藍蛋白。

8.根據權利要求7所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的應用，其特征在于步驟一中所述的可與水互溶的有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、四氫呋喃或乙腈。

9.根據權利要求7或8所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的應用，其特征在于步驟三中所述的待測溶液為烏賊養殖廢水、章魚養殖廢水、螃蟹養殖廢水或蝦類養殖廢水。

10.根據權利要求6所述的一種基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的應用，其特征在于利用基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針熒光法定性檢測溶液中血藍蛋白的方法，按照以下步驟進行：

一、按基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針的濃度為0.5～1mmol/L，將基于菲并咪唑的血藍蛋白熒光探針溶解于可與水互溶的有機溶劑中，配置成探針儲備液A；

二、將步驟一得到的探針儲備液A采用濃度為0.01mol/L、pH＝7.40的HEPES溶液稀釋為濃度為0.01～0.05mmol/L的探針溶液B；

三、將步驟二得到探針溶液B與待測溶液充分混合，得到測試溶液C；

四、以370nm為激發波長，測定探針溶液B的熒光發射光譜在發射波長為540nm時的發射強度，記為T_B；

五、以370nm為激發波長，測定測試溶液C的熒光發射光譜在發射波長為510nm時的發射強度，記為T_C；

六、比較T_B和T_C，若T_C6T_B，則判斷待測溶液中含有血藍蛋白。