[發(fā)明專利]一種分離純化殺鼠靈原藥樣品中未知雜質(zhì)的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010111040.9
• 申請(qǐng)日: 2020-02-24
• 公開（公告）號(hào): CN111257459A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周曉渭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海洲銳生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上海微策知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31333
• 代理人: 湯俊明

本發(fā)明涉及藥物分析領(lǐng)域，具體公開了一種分離純化殺鼠靈原藥樣品中未知雜質(zhì)的方法，至少包括以下步驟：首先稱取待檢測的殺鼠靈原藥，加入溶劑溶解，得到殺鼠靈原藥溶液；其次再將殺鼠靈原藥溶液注入色譜儀中進(jìn)行檢測，并控制其進(jìn)樣量、紫外檢測波長、色譜柱、柱溫、流動(dòng)相和流速，可將殺鼠靈原藥樣品中的雜質(zhì)進(jìn)行有效分離，本發(fā)明采用的分析方法具有分離效率高、分析速度快、檢測靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物分析領(lǐng)域，具體涉及一種分離純化殺鼠靈原藥樣品中未知雜質(zhì)的方法。

背景技術(shù)

制備液相色譜是以獲取純樣品為目的的一種分離技術(shù)，自20世紀(jì)30年代應(yīng)用于色素的分離至今，得到了長足發(fā)展。20世紀(jì)80年代高效制備液相色譜在醫(yī)藥工業(yè)中有了迅速的發(fā)展，90年代在蛋白的分離純化上得到大量應(yīng)用。如今，制備色譜幾乎在社會(huì)生產(chǎn)生活的各個(gè)領(lǐng)域均有應(yīng)用，如次生類代謝產(chǎn)物、天然產(chǎn)物、大分子化合物及某些重要的藥用生物活性蛋白、生物治療品與診斷試劑的分離純化。

但是在現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)殺鼠靈原藥樣品中未知雜質(zhì)分離和純化的方法較為復(fù)雜，由此研究一種精準(zhǔn)、快速、高靈敏度、重復(fù)性高的分析方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員研究的熱點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種分離純化殺鼠靈原藥樣品中未知雜質(zhì)的方法，至少包括以下步驟：

(1)稱取待檢測的殺鼠靈原藥，加入溶劑溶解，得到殺鼠靈原藥溶液；

(2)將殺鼠靈原藥溶液注入色譜儀中進(jìn)行檢測，并控制其進(jìn)樣量、紫外檢測波長、色譜柱、柱溫、流動(dòng)相和流速，得到結(jié)果。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述步驟(1)中的溶劑選自DMF、甲醇、乙腈、水中的一種或多種。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，步驟(1)中所述的溶劑為DMF和乙腈，其中DMF和乙腈的體積比為1：(2～6)。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述殺鼠靈原藥溶液的濃度為150～250mg/mL；所述進(jìn)樣量為8～18mL。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述紫外檢測波長為220nm～360nm。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述色譜柱為Waters Xbridge C18，長度為250mm，內(nèi)徑為30mm，粒徑10μm。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述流動(dòng)相選自甲醇、乙腈、水、磷酸二氫鉀水溶液、磷酸二氫鈉水溶液中的一種或多種。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述流動(dòng)相為乙腈和磷酸二氫鈉水溶液。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述流動(dòng)相在0～30min內(nèi)為梯度洗脫，在0min時(shí)，乙腈和磷酸二氫鈉水溶液的體積比為1:9；在30min時(shí)，乙腈和磷酸二氫鈉水溶液的體積比為(7:3)～(9:1)。

作為本發(fā)明一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述流速為30-50mL/min。。

有益效果：本發(fā)明提供了一種分離純化殺鼠靈原藥樣品中未知雜質(zhì)的方法，本發(fā)明通過對(duì)方法的合理設(shè)計(jì)，與現(xiàn)有的方法技術(shù)相比，具有明顯的優(yōu)點(diǎn)：分離雜質(zhì)的精確度高、純度高，雜質(zhì)的專屬性、線性及范圍、回收率、精密度、耐用性等試驗(yàn)均良好；且流動(dòng)相配制簡單、檢測成本低等。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發(fā)明的一些實(shí)施方式，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為實(shí)施例1中鼠靈原藥樣品HPLC-MS預(yù)掃描的HPLC譜圖。