[發明專利]一種基于間接比色法檢測NO的試劑盒及其制備使用方法

在審

• 申請號: 202010109039.2
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111289501A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 芮雙印;李祥宇
• 申請（專利權）人: 安徽大千生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

本發明提供了一種基于間接比色法檢測NO的試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中，試劑R1包括緩沖液、無機鹽、保護劑、表面活性劑、防腐劑，溶劑為純化水；試劑R2包括緩沖液、無機鹽、防腐劑，溶劑為純化水。本發明還提供了一種基于間接比色法檢測NO的試劑盒的制備使用方法。本發明的優點在于：解決了現有市場上流通的檢測NO的缺點，可以使用全自動生化分析儀檢測NO，操作簡便、檢測速度快、精密度高、重復性好，最重要的一點是還能提高試劑的靈敏度和穩定性。

技術領域

本發明涉及生物化學和試劑制備領域，尤其涉及一種基于間接比色法檢測NO的試劑盒及其制備使用方法。

背景技術

一氧化氮(NO)是一種化學性質比較活潑的氣體分子。在生理條件下，機體內NO濃度極低，是由一氧化氮合成酶(nitric oxide sythase，NOS)催化L-精氨酸(L-Arg)，在NADPH和O₂的參與下形成的。NO在生物體內是一種雙重作用的信使分子，作為第二信使和神經遞質，同時是細胞間和細胞內信息傳遞的重要調節因子。NO具有獨特的理化性質和生物學活性作用。在病理條件下，當NO的代謝失衡，就會導致心血管、呼吸、神經等系統的多種疾病。

研究表明，NO可能就是血管內皮舒張因子(endothelium-derived relaxingfator,EDRF)，其異常與臨床多種疾病的發生及發展有關。NO具有擴張血管、調節血壓、抑制白細胞黏附和血小板聚集和介導心肌細胞凋亡等作用，在心血管疾病的防治和干預治療方面發揮了重要的作用。

以下為NO濃度在臨床上的具體表現與意義：

(1)心、腦血管病

高血壓?。焊哐獕旱陌l病及病情與血中NO水平有關，病情越重，NO降低越明顯，兩者呈顯著負相關。

冠心?。篘O在冠心病的發病及發展過程中起著重要作用，冠心病患者NO濃度顯著低于對照組(P＜0.05)，而且，心絞痛發作與否，是否伴有高血壓、高膽固醇血癥，血清NO濃度差異均有顯著性。

腦梗塞：腦梗塞患者發病24小時后NO水平與神經功能分呈顯著正相關，與梗塞灶直徑無顯著相關性。

(2)肺病

慢性肺心?。篘O反映肺心病心衰狀況并與肺部的炎癥有關。

慢性阻塞性肺疾病(COPD)：COPD急性發作期患者，血清NO濃度明顯降低，隨著病情好轉而有所增加，但即使在緩解期，NO水平仍低于正常值，說明NO在COPD的發生和發展中起著重要作用。

(3)腎臟疾病

腎小球腎炎：急性腎小球腎炎好轉的患者血清NO含量明顯高于正常人，提示體內NO合成亢進；慢性腎小球腎炎好轉的患者血清NO含量明顯低于正常人，揭示內源性NO合成不足。說明NO在腎臟的致病作用具有雙重性。

慢性腎功能衰竭：慢性腎功能衰竭患者不同病變時期和透析前后血清中NO含量的變化，發現尿毒癥期(血清肌酐＞445umol/L)則明顯升高；血液透析后NO濃度較透析前明顯下降。

腎綜合征出血熱(HFRS)：通過檢測NO在HFRS患者血清中的動態變化，發現HFRS患者從發熱期至多尿期NO含量明顯增加，提示NO在HFRS的血管內皮損傷和免疫活性物質分泌異常均起重要作用，對患者作NO的動態觀察可作為判斷病情的有效指標。

72例腎臟病患者的血清NO水平顯著高于健康對照組，說明各種腎病的發生發展過程可能與NO的產生過多有關。

(4)腫瘤