[發明專利]一種基于間接比色法檢測NO的試劑盒及其制備使用方法

在審

• 申請號: 202010109039.2
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111289501A
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 芮雙印;李祥宇
• 申請（專利權）人: 安徽大千生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

1.一種基于間接比色法檢測NO的試劑盒，其特征在于，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應含量為：

試劑R1：

其溶劑為純化水；

試劑R2：

緩沖液 0.6-15g/mL

無機鹽 3-50g/mL

防腐劑 0.05％-0.5％

其溶劑為純化水。

2.根據權利要求1所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中，所述緩沖液為檸檬酸緩沖液、磷酸緩沖液、HEPES緩沖液、三羥甲基氨基甲烷緩沖液、甘氨酸緩沖液、2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液、3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸緩沖液中的一種或多種；所述無機鹽為3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽、EDTA-Na2、EDTA、二水檸檬酸鈉、鹽酸多巴胺、NaOH、氯化鈉、氯化鎂中的一種或多種；所述保護劑為乙二醇、三乙胺、丙三醇、三乙醇胺中的一種或多種；所述表面活性劑為曲拉通X-100、吐溫-20、吐溫-80中的一種或多種；所述防腐劑為Proclin300、疊氮鈉中的一種或多種。

3.根據權利要求2所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒，其特征在于，所述試劑R1包括的成分及相應含量具體為：

其溶劑為純化水。

4.根據權利要求1所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中，所述緩沖液為檸檬酸緩沖液、磷酸緩沖液、HEPES緩沖液、三羥甲基氨基甲烷緩沖液、甘氨酸緩沖液、2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液、3-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸緩沖液中的一種或多種；所述無機鹽為3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽、EDTA-Na2、EDTA、二水檸檬酸鈉、鹽酸多巴胺、NaOH、氯化鈉、氯化鎂中的一種或多種；所述防腐劑為Proclin300、疊氮鈉中的一種或多種。

5.根據權利要求4所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒，其特征在于，所述試劑R2包括的成分及相應含量具體為：

其溶劑為純化水。

6.一種如權利要求1-5任一所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下具體步驟：

(1)配制試劑R1：

按照試劑R1的組分含量，將各組分物質于同一容器中混合，混合均勻后，調pH至5.35-5.45，制得試劑R1；

(2)配制試劑R2：

按照試劑R2的組分含量，將各組分物質于同一容器中混合，混合均勻后，調pH至6.75-6.85，制得試劑R2。

7.一種如權利要求1-5任一所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒的使用方法，其特征在于，包括如下具體步驟：

(1)吸取10μL樣本，加入240μL試劑R1，37℃孵育5min；

(2)加入80μL試劑R2，置37℃孵育；

(3)孵育1min后讀取吸光值A1；孵育5min后讀取吸光值A2；按照ΔA＝A2-A1來計算ΔA，根據ΔA測算樣本中NO含量。

8.根據權利要求7所述的基于間接比色法檢測NO的試劑盒的使用方法，其特征在于，所述基于間接比色法檢測NO的試劑盒用于細胞裂解液、細胞培養液、組織裂解液、血清、血漿、尿液中NO含量的測定。