[發明專利]一種用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒及其制備使用方法

在審

• 申請號: 202010109038.8
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111308087A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 芮雙印;符修樂;魯萍
• 申請（專利權）人: 安徽大千生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/531
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

本發明提供了一種用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分；試劑R1包括緩沖液、表面活性劑、防腐劑、螯合劑，溶劑為去離子水；試劑R2包括緩沖液、抗sTfR抗體膠乳顆粒、防腐劑、助懸劑，溶劑為去離子水。本發明還提供了一種用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒的制備使用方法。本發明的優點在于：本發明基于膠乳增強免疫比濁法，操作簡單、檢測速度快；此外，相比其他試劑盒，本發明試劑盒的穩定性得到了大大的提高。

技術領域

本發明涉及生物化學技術領域，尤其涉及一種用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒及其制備使用方法。

背景技術

血清sTfR的存在是由Kohgo在1986年首次證實的，此后，sTfR在貧血中的臨床診斷價值日益受到重視，其作為一項評估組織細胞鐵消耗的指標，有著重要應用價值。鐵缺乏癥是體內缺鐵發展不同階段的總稱，根據病理、生理和臨床表現，分為儲鐵缺乏(irondepletion,ID)、缺鐵性紅細胞生成(irondeficienterythropoiesis，IDE)和缺鐵性貧血(irondeficiencyanemia，IDA)三個連續發展的階段，可見IDA是體內慢性漸進性缺鐵的發展結果。

血清鐵(SI)、總鐵結合力(TIBC)、轉鐵蛋白飽和度(TS)、轉鐵蛋白(TF)、血清鐵蛋白(SF)是診斷缺鐵性貧血(IDA)傳統的常用的鐵參數。這些鐵參數的診斷標準有較多爭議的問題，有時會給臨床帶來一些困惑。自從1986年Kohgo應用放免法檢出人血清中存在少量sTfR后，人們對sTfR進行了大量的研究，越來越多的研究證明sTfR在缺鐵性貧血中的診斷價值，幾乎所有的研究都提示：在機體鐵缺乏時，sTfR是升高的。Skikne等研究發現：在儲存鐵減少階段，SF迅速降低，而sTfR僅輕微升高，隨著儲存鐵耗竭而組織缺鐵時，sTfR迅速升高，并與組織缺鐵的嚴重程度呈正相關。當組織缺鐵達5mg/L(相當于丟失1-2U全血)時，sTfR升至正常的2倍，而其他鐵參數如紅細胞游離原卟啉(FEP)、TS、S1、TIBC等均未見明顯改變，而發展到IDA時，sTfR可上升至正常的2-3倍。因此，可認為sTfR是唯一能對紅細胞生成缺鐵期(IDE)做出診斷的敏感指標，可反映造血組織早期缺鐵。有些學者還對sTfR和幾種傳統的鐵參數在缺鐵性貧血中的診斷價值做了比較，從ROCAUC看，以sTfR的診斷價值最大。

可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)比常規鐵代謝參數更有優勢，其穩定性和可靠性好，除了無性別和年齡差異、生理波動和日間差異小以外，其濃度不受各種疾病因素的干擾，不僅能用于IDA的早期診斷，還可以區別在炎癥作用下血清鐵蛋白升高的貧血患者，特別是在鑒別復雜類型的貧血方面有著重大意義。

目前，可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)的檢測方法多是基于普通的免疫比濁法和酶聯免疫吸附法(ELISA)。普通的免疫比濁法是利用反應中的抗原抗體反應形成免疫復合物，在一定時間內復合物聚合出現濁度，該檢測方法要求反應時形成的免疫復合物的數量和分子量達到一定的高度，不然就很難測出。酶聯免疫吸附法(ELISA)是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術，該方法檢測操作繁瑣、自動化程度低、耗時長，不利于快速檢測。

膠乳增強免疫比濁法是將待測物質相對應的抗體包被在膠乳顆粒上，使抗原抗體結合物的體積增大，光通過之后，透射光和散射光的強度變化更為顯著，從而提高試驗的敏感性。此方法操作步驟簡便，幾分鐘就能獲得測試結果，也避免了許多人為操作帶來的誤差和外界環境因素的干擾，能較準確真實的反映被測物質的含量。不過，膠乳增強免疫比濁法檢測sTfR試劑盒仍存在一定的穩定性問題。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種基于膠乳增強免疫比濁法，并且穩定性好的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒及其制備使用方法。

本發明采用以下技術方案解決上述技術問題：