[發明專利]一種用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒及其制備使用方法

在審

• 申請號: 202010109038.8
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111308087A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: 芮雙印;符修樂;魯萍
• 申請（專利權）人: 安徽大千生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/531
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 王偉

1.一種用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應含量為：

試劑R1：

其溶劑為去離子水；

試劑R2：

其溶劑為去離子水。

2.根據權利要求1所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R1中，緩沖液具體為Tris緩沖液，表面活性劑為吐溫20，防腐劑為Proclin300，螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉。

3.根據權利要求1所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R1的pH值為7.2-8.0。

4.根據權利要求1所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中，緩沖液具體為磷酸鹽緩沖液，防腐劑為Proclin 300，助懸劑為聚乙二醇。

5.根據權利要求1所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中，抗sTfR抗體膠乳顆粒的粒徑為50-150nm，采用的抗sTfR抗體為sTfR單克隆抗體或sTfR多克隆抗體。

6.根據權利要求1所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R2的pH值為7.2-8.0。

7.根據權利要求1-6任一所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述抗sTfR抗體膠乳顆粒的獲取方法如下：

(1)清洗：取氨基膠乳微球顆粒溶液用PBS溶液稀釋，震蕩混合均勻，離心棄上清液，保留沉淀；

(2)活化：在沉淀中加入活化劑活化，震蕩混合均勻，再離心棄上清液，保留沉淀；

(3)偶聯：在沉淀中加入PBS溶液稀釋，震蕩混合均勻后再加入抗sTfR抗體，震蕩混合均勻；再離心棄上清液，保留沉淀；

(4)封閉：在沉淀中加入封閉液，震蕩混合均勻，即得包被抗sTfR抗體的膠乳顆粒溶液。

8.根據權利要求7所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒，其特征在于，所述步驟(2)中的活化劑與步驟(4)中的封閉液均為PBS溶液。

9.一種如權利要求1-8任一所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下具體步驟：

(1)配制試劑R1：

按照試劑R1的組分含量稱取原料，并將各原料溶解于去離子水中；攪拌均勻后，用鹽酸或氫氧化鈉調pH，最終再用去離子水定容，制得試劑R1；

(2)配制試劑R2：

按照試劑R2的組分含量稱取原料，并將“抗sTfR抗體膠乳顆粒”以外的各原料溶解于去離子水中；攪拌均勻后，用鹽酸或氫氧化鈉調pH，接著加入制備好的抗sTfR抗體膠乳顆粒，攪拌均勻后再用去離子水定容，制得試劑R2。

10.一種如權利要求1-8任一所述的用于檢測可溶性轉鐵蛋白受體sTfR的測定試劑盒的使用方法，其特征在于，包括如下具體步驟：

(1)吸取3μL樣本，加入150μL試劑R1，混勻并置于37℃孵育5min，讀取吸光度A1；

(2)讀取吸光度A1后，加入30μL試劑R2，混勻并置于37℃孵育5min，讀取吸光度A2；

(3)按照ΔA＝A2-A1來計算ΔA，根據ΔA測算樣本中sTfR含量。