[發(fā)明專利]一種可以評估肝臟纖維化程度的肝星狀細胞靶向磁共振分子顯像劑及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010108064.9
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111407899A
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周洋;王凱;黃圣航;張子謙
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱醫(yī)科大學
• 主分類號: A61K49/10
• 分類號: A61K49/10;A61K47/52;A61K31/4375;A61P1/16
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 11617
• 代理人: 栗華楠

本發(fā)明公開了一種可以評估肝臟纖維化程度的肝星狀細胞靶向磁共振分子顯像劑及其制備方法，屬于藥物和生物成像技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過耦聯(lián)視黃醇分子和AKT抑制劑，可以特異性靶向肝星狀細胞，檢測肝臟纖維化的程度及發(fā)展過程。其特點在于歐聯(lián)有視黃醇具有磁共振顯像功能，同時歐聯(lián)的抑制AKT具有治療肝纖維化的功能，達到診療一體化的目的。其特點在于顯像靈敏度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物和生物成像技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種可以評估肝臟纖維化程度的肝星狀細胞靶向磁共振分子顯像劑及其制備方法。

背景技術(shù)

肝纖維化和肝硬化是常見的慢性進行性肝臟疾病，是肝臟對慢性損傷進行的一種修復反應。受損的肝細胞和活化的枯否氏細胞分泌的各種細胞因子會導致肝星狀細胞(HSC)活化成為肌纖維母細胞，活化的星狀細胞合成并分泌大量的以膠原為主的細胞外基質(zhì)沉積在肝臟，導致肝纖維化的產(chǎn)生，肝纖維化可進一步發(fā)展成為肝硬化。

肝纖維化是慢性損傷導致肝臟細胞外基質(zhì)(ECM)過度沉積，肝星狀細胞(HSC)是肝纖維化的主要效應細胞。在各種因素作用下，肝細胞、枯否氏細胞(Kupffer)、內(nèi)皮細胞和星狀細胞自身可產(chǎn)生多種細胞因子與活化產(chǎn)物等，這些因子可以通過各種信號通路調(diào)節(jié)HSC的功能，PI3K/Akt是其中重要的一條通路。

肝纖維化無創(chuàng)傷性的評估方法有：1)纖維化血清標記物。器官特異性差，易受炎癥和機體代謝的干擾，標準化困難，組合指標更多反映炎癥，對纖維化分期較困難；2)生化指標。需多項組合(如Fibrotest)。由于肝臟極強的儲備功能，只在嚴重肝纖維化時改變明顯，并且生化指標影響因素多，解釋困難，不同病因、不同時期的肝纖維化評估的準確性不同；3)常規(guī)影像。目前常規(guī)B超、CT、MRI難于反映肝纖維化早期改變，評估多限于肝硬化及并發(fā)癥。

目前診斷和評估肝纖維化的方法都未能較好反映慢性肝損傷修復過程中活化細胞表型和數(shù)量變化等分子病理改變，在可靠性、敏感性、可操作性等方面存在不一致性，尚難達到臨床對肝纖維化早期診斷和治療效果實時動態(tài)評估的要求。不能對肝纖維化做出正確評估一直以來是制約基礎(chǔ)研究走向臨床的“瓶頸”，也是不能開發(fā)抗纖維化藥物與臨床試驗的重要原因。

目前在臨床上，肝活檢仍是評估肝纖維化的唯一“金標準”。然而，肝活檢是有創(chuàng)的，可引起相應的并發(fā)癥，因此不能被患者普遍接受，這造成了很大一部分慢性肝病患者在診斷和治療上的延誤；同時，在無明顯癥狀的患者中，很難重復進行肝活檢，這就無法準確地隨訪慢性肝病患者病情的變化；此外，樣本取樣誤差和病理觀察的不一致性都影響了肝活檢的準確性。因此，需要一種精確的無創(chuàng)傷性的方法來診斷和評估肝纖維化。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種可以準確評估肝纖維化程度的磁共振分子顯像劑，通過耦聯(lián)視黃醇分子及AKT抑制劑，可以特異性靶向肝星狀細胞，檢測肝臟纖維化的程度及發(fā)展過程，其特點在于同時具有抑制AKT，治療肝纖維化的功能，達到診療一體化的目的。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。

1)磷化鐵納米顆粒制備：將0.01-10g乙酰丙酮鐵分散于2-200mL油胺中，加入0.1-200mL三辛基膦；所得混合液升溫至120℃，反應30分鐘，隨后繼續(xù)升溫到300-350℃，反應0.5-10小時；反應停止后待反應液自然冷卻至室溫，再按體積比1:3-5加入乙醇、異丙醇或丙酮進行離心處理，所得沉淀為油溶性的磷化鐵納米顆粒；

2)視黃醇活化：取0.56gN,N-羰基二咪唑(CDI)溶于20ml二甲基亞砜(DMSO)中，完全溶解后加入1g視黃醇，在避光條件下30℃恒溫攪拌24小時，得到活化的視黃醇。

3)磷化鐵納米顆粒與視黃醇連接：將0.1-500mg油溶性的磷化鐵納米顆粒溶解于1-50mL氯仿中；將0.5-500mg的視黃醇溶于1-50mL氯仿中；然后將兩種溶液充分混合，于通風櫥中靜置以使液體揮發(fā)消失，再使用真空泵抽至完全除去溶劑，加水重新溶解，即得到表面配體為視黃醇的磷化鐵納米顆粒造影劑溶液。