[發(fā)明專利]一種基于固相微萃取的合成藥物基因毒性雜質(zhì)分析方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010108031.4
• 申請日: 2020-02-21
• 公開（公告）號: CN111266094B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙燕芳;謝含儀;李靖坤;陳相峰;李慧娟;趙梅
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省分析測試中心
• 主分類號: B01J20/281
• 分類號: B01J20/281;B01J20/22;B01J20/28;B01J20/30;G01N30/02;G01N30/08
• 代理公司: 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 張曉鵬

本發(fā)明涉及一種基于固相微萃取的合成藥物基因毒性雜質(zhì)分析方法。固相微萃取纖維包括共價有機骨架納米微球和纖維載體，共價有機骨架納米微球負載在纖維載體的表面。共價有機骨架納米微球由三?(4?氨基苯基)?胺和三?(4?甲酰基苯基)?胺兩種配體結(jié)合形成。實現(xiàn)原料藥物中基因毒性雜質(zhì)的測定。本發(fā)明的固相微萃取纖維具有耐高溫，重復(fù)使用次數(shù)高，吸附能力強的特性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因毒性雜質(zhì)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種固相微萃取纖維及其制備方法和在合成藥物基因毒性雜質(zhì)分析中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

公開該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

目前，絕大多數(shù)的藥物是經(jīng)過化學(xué)合成方法或者通過修飾天然產(chǎn)物來生產(chǎn)的。無論哪一種方式，合成中均會使用多種反應(yīng)試劑。這些試劑在生產(chǎn)過程中往往會有少量殘留或者產(chǎn)生諸多副產(chǎn)物，形成具有一定未知毒性，尤其是基因毒性的雜質(zhì)。原料藥物以及成品藥物中存在對遺傳物質(zhì)產(chǎn)生影響的小分子物質(zhì)，這已經(jīng)廣泛引起了各國監(jiān)管部門、制藥公司、醫(yī)院以及患者的廣泛關(guān)注。

基因毒性雜質(zhì)導(dǎo)致遺傳物質(zhì)發(fā)生突變的作用機制并不復(fù)雜，這些雜質(zhì)通常具有親電基團，或是能夠代謝為具有親電基團的物質(zhì)，然后和DNA上的親核基團發(fā)生反應(yīng)。DNA結(jié)構(gòu)中的腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和磷酸酯骨架上均富有電子，遇缺電子試劑，易發(fā)生取代反應(yīng)。這些缺電子試劑主要包括烷基鹵代物、烷基硫酸鹽、環(huán)氧化物、肼類、四甲基哌啶氮氧化物、芳香胺類和硼酸類等。藥物生產(chǎn)過程中要完全去除這些基因毒性雜質(zhì)，實際難度非常大。因此，美國食品藥品管理局等機構(gòu)頒布了相關(guān)的指導(dǎo)文件，并給出了毒理學(xué)的關(guān)鍵閾值以控制生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的基因毒性雜志的殘留。實際基因毒性雜質(zhì)的檢測方法往往采用限度檢查法。藥物中基因毒性雜質(zhì)來源主要有三類。(1)基因毒性試劑類主要來源于合成過程中使用的原材料、反應(yīng)試劑、催化劑等的殘留。(2)中間過程合成產(chǎn)物，由合成過程中多種試劑或者中間體反應(yīng)生成具有警示結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)成分。(3)降解產(chǎn)物通常由儲存或者運輸過程中的不利條件導(dǎo)致藥物中一些組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，從而產(chǎn)生具有警示結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)成分。基因毒性雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)繁雜，種類眾多，針對一類基因毒性雜質(zhì)來開發(fā)合適的分析方法成為研究的重點和難點。常規(guī)的固相萃取法存在靈敏度低、基質(zhì)干擾大等弊端。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種固相微萃取纖維及其制備方法和在合成藥物基因毒性雜質(zhì)分析中的應(yīng)用。本發(fā)明采用頂空固相微萃取法，采用共價有機骨架納米微球作為吸附劑，對多種基因毒性雜質(zhì)進行了定量分析，該方法在精密度、重現(xiàn)性、靈敏度等方面均滿足定量要求。

為了解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

第一方面，一種固相微萃取纖維，包括共價有機骨架納米微球(CONs)和纖維載體，共價有機骨架納米微球負載在纖維載體的表面。

本發(fā)明的共價有機骨架納米球材料對原料藥中的缺電子試劑即殘留物或副產(chǎn)物進行檢測，檢測范圍較寬，可以對原料藥中多種溶劑殘留及副產(chǎn)物等多種具有基因毒性的缺電子化合物進行分析。

在本發(fā)明的一些實施例中，共價有機骨架納米微球由三-(4-氨基苯基)-胺和三-(4-甲酰基苯基)-胺兩種配體結(jié)合形成。

優(yōu)選的，三-(4-氨基苯基)-胺和三-(4-甲酰基苯基)-胺兩種配體的質(zhì)量比為：0.5-1:1；進一步優(yōu)選為0.8-0.9:1。

在本發(fā)明的一些實施例中，纖維載體為不銹鋼纖維、玻璃纖維等。

第二方面，上述固相微萃取纖維的制備方法，所述方法為：將纖維載體進行刻蝕，刻蝕后的纖維載體表面粘附密封膠，然后將纖維載體放置在共價有機骨架納米微球的分散液中浸漬，取出干燥、老化得到共價有機骨架納米纖維。共價有機骨架納米纖維也稱為固相微萃取纖維。