[發明專利]一種用熒光SSR分子標記構建蘋果新品種‘赤霞’分子身份證的方法及應用

在審

• 申請號: 202010104838.0
• 申請日: 2020-02-20
• 公開（公告）號: CN111218522A
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 侯麗媛;曹秋芬;張春芬;鄧舒;肖蓉;董艷輝;趙菁
• 申請（專利權）人: 山西省農業科學院生物技術研究中心
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6869;C12N15/11;G16B20/20
• 代理公司: 太原晉科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 翟沖燕

本發明屬植物分子遺傳學和蘋果種質創新技術領域，提供一種用熒光SSR分子標記構建蘋果栽培新品種‘赤霞’分子身份證的方法及應用。所述分子標記為7對熒光SSR分子標記，為：熒光SSR分子標記G142，熒光SSR分子標記G147，熒光SSR分子標記G162，熒光SSR分子標記01f02，熒光SSR分子標記01h01，熒光SSR分子標記02d08，熒光SSR分子標記02d12。7對熒光SSR分子標記多態性均較好，可以對‘赤霞’能進行有效的區分。對蘋果栽培新品種‘赤霞’進行快速、準確的鑒定。對新品種保護、利用、推廣及種質資源收集提供依據。

技術領域

本發明屬于植物分子遺傳學和蘋果種質創新技術領域，具體涉及一種用熒光SSR分子標記構建蘋果栽培新品種‘赤霞’分子身份證的方法及應用，涉及蘋果新品種的鑒定及其分子身份證構建的方法。

背景技術

我國是蘋果屬（Malus Mill.）種質的起源演化中心之一，擁有的蘋果種質資源豐富，品種類型多樣。2017年全世界蘋果產量為7621萬噸，而我國種植面積和總產量均占全世界的50%左右，蘋果出口位居世界前列，中國已成為世界上最大的蘋果生產國，我國正從蘋果生產大國向蘋果產業強國邁進。隨著蘋果屬種質資源的創新和蘋果新品種的選育，加之中國乃至世界各地的頻繁交流，導致蘋果種質混雜現象層出不窮。因此，對于蘋果栽培品種來說，種質資源的準確鑒定是品種保存和育種利用的重要前提，而從知識產權保護的角度出發也是對育種者的有效保護，可見對于栽培品種的準確鑒定對保護品種的真實性、維護育種家和生產者的權益來說都顯得尤為重要。

熒光SSR分子標記是在SSR分子標記基礎上發展起來的一種新的分子標記技術，是熒光測序技術與SSR檢測技術的有效結合，具有高度智能化，實現了數據的快速收集，提高了工作效率，避免了人工讀帶造成的誤差，數據更加準確。

蘋果栽培新品種‘赤霞’是山西省農業科學院生物技術研究中心自主選育的蘋果新品種，該品種是從‘千秋’和‘津輕’的雜交后代中選育而來的，目前已經通過中華人民共和國農業農村處非主要農作物品種審定，并于2019年6月13日獲得了中華人民共和國農業農村處非主要農作物品種登記證書，登記編號：GPD蘋果（2019）140004。該蘋果品種屬中熟品種，成熟期在9月上旬；果實比普通‘嘎拉’稍大；果實顏色濃紅，果肉脆，有香味，采摘期可以延長至10月上旬，有少量落果，果實保持緊脆，延遲采摘香味和色澤更濃；耐貯藏性好，貯后不綿；果實易著色，不用套袋能全果面濃紅，可作為中熟品種大量發展。

利用熒光SSR分子標記，建立蘋果栽培新品種‘赤霞’的指紋圖譜，并在此基礎上構建它們獨特的條形碼鑒定標識即分子身份證，實現蘋果栽培新品種‘赤霞’的快速鑒定，為蘋果種質資源的快速鑒定及利用奠定基礎。

發明內容

本發明目的在于提供一種用熒光SSR分子標記技術構建蘋果栽培新品種‘赤霞’分子身份證的方法及應用。

本發明是通過以下技術方案實現的：一種用熒光SSR分子標記構建蘋果栽培新品種‘赤霞’的分子身份證，所述熒光標記為6-FAM^TM熒光標記，將SSR分子的正向引物5'端分別用6-FAM^TM熒光標記進行分子標記，所述SSR分子為7對熒光SSR標記，具體分別為：熒光SSR分子標記G142，熒光SSR分子標記G147，熒光SSR分子標記G162，熒光SSR分子標記01f02，熒光SSR分子標記01h01，熒光SSR分子標記02d08，熒光SSR分子標記SSR標記02d12；用于擴增上述標記的引物分別為：

熒光SSR分子標記G142核苷酸序列如SEQ ID No.1、2所示；

熒光SSR分子標記G147核苷酸序列如SEQ ID No.3、4所示；

熒光SSR分子標記G162核苷酸序列如SEQ ID No.5、6所示；

熒光SSR分子標記01f02核苷酸序列如SEQ ID No.7、8所示；