[發明專利]一種土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分離方法

在審

• 申請號: 202010104037.4
• 申請日: 2020-02-20
• 公開（公告）號: CN111117774A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 李娜;龍靜泓;盛明
• 申請（專利權）人: 中國科學院東北地理與農業生態研究所
• 主分類號: C11C1/00
• 分類號: C11C1/00
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 何強

1.一種土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分離方法，其特征在于一種土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分離方法按照以下步驟進行：

一、配制Blight-Dyer提取液：

將氯仿、甲醇和檸檬酸按照1:2:0.8的體積比混合，即得Blight-Dyer提取液；

二、將3g冷凍干燥土樣加入到帶蓋玻璃試管(1)中，加入1.5ml檸檬酸鈉緩沖液、3.8ml甲醇、1.9ml氯仿和2ml Blight-Dyer提取液，蓋上玻璃蓋(5)，得混合液，所述檸檬酸鈉緩沖液濃度為0.15mol/L，pH值為4；

三、將步驟二的混合液渦旋2min，靜止2h，以3000rpm離心10min，用長嘴膠頭吸管(2)吸取上清液轉移到另一個帶蓋玻璃試管(1)中，沉淀；

四、向沉淀后的濾渣內，加入1.5ml檸檬酸鈉緩沖液、3.8ml甲醇、1.9ml氯仿和2mlBlight-Dyer提取液，蓋上玻璃蓋(5)，得混合液，所述檸檬酸鈉緩沖液濃度為0.15mol/L，pH值為4；

混合液渦旋2min，靜止2h，以3000rpm離心10min，用長嘴膠頭吸管(2)吸取上清液轉移到另一個帶蓋玻璃試管(1)中，沉淀；

五、重復步驟四2次，收集所有上清液并合并，即完成土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分離。

2.根據權利要求1所述一種土壤中微生物磷脂脂肪酸的固液相高效分離方法，其特征在于步驟三中所述用長嘴膠頭吸管(2)吸液方法如下：

在長嘴膠頭吸管(2)的細長嘴進入帶蓋玻璃試管(1)前，用力擠吸管的膠頭(3)，排凈長嘴膠頭吸管(2)內的空氣，將長嘴膠頭吸管(2)不觸碰帶蓋玻璃試管(1)的內壁勻速進入帶蓋玻璃試管(1)內，待長嘴膠頭吸管(2)的細長嘴到達并進入上清液后，再慢慢放開長嘴膠頭吸管(2)的膠頭(3)，上清液便慢慢被吸入長嘴吸管內。