[發(fā)明專利]一種表達拉沙熱病毒空衣殼的重組病毒及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010103832.1
• 申請日: 2020-02-20
• 公開（公告）號: CN111206022A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙忠鵬;李靖;李敏;李霄;焦俊;楊曉嵐;谷宏婧;張真;申夢;劉媛
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫(yī)學研究院
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/863;C12N15/40;C07K14/08;C12N15/63;A61K39/12;A61K39/285;A61K39/275;A61P31/14;A61P31/20;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 白鳳瑩

1.重組病毒的構(gòu)建方法，其特征在在于：所述構(gòu)建方法包括如下步驟：

將轉(zhuǎn)移質(zhì)粒與痘病毒共轉(zhuǎn)染宿主細胞，得到重組病毒；

所述轉(zhuǎn)移質(zhì)粒包含以痘病毒嚴格的非必需區(qū)基因的上、下游同源臂為基礎(chǔ)構(gòu)建的重組DNA分子，所述重組DNA分子包括拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白Z基因、拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白GPC基因和拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白NP基因。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建方法，其特征在于：所述拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白Z基因編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列如SEQ ID NO.2，所述拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白GPC基因編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列如SEQ ID NO.3，所述拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白NP基因編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列如SEQ ID NO.4。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的構(gòu)建方法，其特征在于：所述拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白Z基因的編碼序列為SEQ ID NO.1第508-807位的反向互補序列、所述拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白GPC基因的編碼序列為SEQ ID NO.1第888-2363位和所述拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白NP基因的編碼序列為SEQ ID NO.1第2412-4088位。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的構(gòu)建方法，其特征在于：所述重組DNA分子還包含兩個loxp位點和位于所述兩個loxp位點之間的篩選標記蛋白基因。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的構(gòu)建方法，其特征在于：所述構(gòu)建方法還包括將pVAX1-Cre質(zhì)粒和所述重組痘苗病毒共轉(zhuǎn)染宿主細胞，得到不含篩選標記蛋白基因的重組病毒。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述的構(gòu)建方法，其特征在于：所述痘病毒嚴格的非必需區(qū)基因為胸苷激酶TK基因。

7.權(quán)利要求1-6任一所述的構(gòu)建方法構(gòu)建得到的重組病毒。

8.權(quán)利要求7所述的重組病毒產(chǎn)生的重組病毒樣顆粒。

9.權(quán)利要求8所述的重組病毒樣顆粒如下任一中的應(yīng)用：

1)在制備拉沙熱疫苗中的應(yīng)用；

2)在制備預(yù)防和/或治療拉沙熱的產(chǎn)品中的應(yīng)用；

3)在制備預(yù)防和/或治療痘病毒引起的疾病的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

10.一種轉(zhuǎn)移質(zhì)粒，其特征在于：所述轉(zhuǎn)移質(zhì)粒包含以痘病毒嚴格的非必需區(qū)基因的上、下游同源臂為基礎(chǔ)構(gòu)建的重組DNA分子，所述重組DNA分子包括拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白Z基因、拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白GPC基因和拉沙熱病毒結(jié)構(gòu)蛋白NP基因。