[發明專利]一種用離子轉運蛋白促進鈍齒棒桿菌合成L-精氨酸的方法有效
| 申請號: | 202010095689.6 | 申請日: | 2020-02-17 |
| 公開(公告)號: | CN111172090B | 公開(公告)日: | 2022-02-01 |
| 發明(設計)人: | 饒志明;徐美娟;劉晶;張顯;楊套偉;邵明龍 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/77;C12P13/10;C12R1/15 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇鈺瑩 |
| 地址: | 214000 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 離子 轉運 蛋白 促進 鈍齒棒 桿菌 合成 精氨酸 方法 | ||
1.一種重組鈍齒棒桿菌,其特征在于,所述重組鈍齒棒桿菌過表達了單價陽離子/H+逆轉運蛋白Mrp1A和陽離子轉運ATP酶CTAP1;所述Mrp1A的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示,所述CTAP1的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。
2.如權利要求1所述的重組鈍齒棒桿菌,其特征在于,所述重組鈍齒棒桿菌以pDXW-10作為表達載體。
3.如權利要求1所述的重組鈍齒棒桿菌,其特征在于,所述重組鈍齒棒桿菌以菌株保藏編號為CGMCC NO.0890的鈍齒棒桿菌作為宿主。
4.如權利要求1-3任一所述的重組鈍齒棒桿菌,其特征在于,編碼所述Mrp1A的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.如權利要求1-3任一所述的重組鈍齒棒桿菌,其特征在于,編碼所述CTAP1的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
6.一種促進鈍齒棒桿菌合成L-精氨酸的方法,其特征在于,所述方法是在鈍齒棒桿菌中過表達單價陽離子/H+逆轉運蛋白Mrp1A和陽離子轉運ATP酶CTAP1;所述Mrp1A的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示,所述CTAP1的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示。
7.一種生產L-精氨酸的方法,其特征在于,所述方法是應用權利要求1-5任一所述的重組鈍齒棒桿菌作為生產菌株發酵產L-精氨酸。
8.如權利要求7所述的方法,其特征在于,將OD600為20-30的重組鈍齒棒桿菌接入發酵罐,發酵溫度為28-32℃,pH值為6.5-7.5,攪拌速度為500-700r/min,空氣流量為1-1.5vvm。
9.如權利要求7或8所述的方法,其特征在于,所述發酵罐的裝液量為30%-40%。
10.權利要求1-5任一所述的重組鈍齒棒桿菌在生產L-精氨酸或含L-精氨酸的產品中的應用。
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