[發明專利]一種檢測毒死蜱的側流層析分子印跡試紙條、熒光探針、試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 202010092318.2
• 申請日: 2020-02-14
• 公開（公告）號: CN111089957B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 何亞薈;王靜;李洪巖;孫寶國
• 申請（專利權）人: 北京工商大學
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 董大媛

1.一種檢測毒死蜱的側流層析分子印跡試紙條，包括依次搭接的樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜上依次設置檢測線和質控線，其特征在于，所述檢測線上設置毒死蜱分子印跡聚合物鍍層；所述毒死蜱分子印跡聚合物鍍層上滴涂毒死蜱分子印跡微球。

2.根據權利要求1所述的側流層析分子印跡試紙條，其特征在于，所述毒死蜱分子印跡微球的制備方法包括以下步驟：1)將毒死蜱、乙腈、MAA-β-環糊精混合、預聚合獲得預聚合體系；2)將所述預聚合體系、交聯劑和引發劑混合進行聚合獲得聚合物；3)用洗脫液洗脫毒死蜱后獲得毒死蜱分子印跡微球。

3.根據權利要求2所述的側流層析分子印跡試紙條，其特征在于，步驟1)中所述預聚合的溫度為22～28℃，所述預聚合的時間為25～35min；所述預聚合的過程中伴隨震搖。

4.根據權利要求2或3所述的側流層析分子印跡試紙條，其特征在于，步驟2)中所述聚合的溫度為50～70℃，所述聚合的時間為12～24h；所述聚合在氮氣環境下進行。

5.一種毒死蜱結構類似物-IgG-CdSe/ZnS的熒光探針，其特征在于，所述熒光探針包括毒死蜱結構類似物-IgG偶聯物和包覆在所述毒死蜱結構類似物-IgG偶聯物外層的CdSe/ZnS量子點。

6.根據權利要求5所述的熒光探針，其特征在于，所述毒死蜱結構類似物包括O,O-二乙基-O-[3,5-二氯-6-(2-羧乙基)硫代-2吡啶基]硫逐磷酸酯。

7.權利要求5或6所述的熒光探針的制備方法，包括以下步驟：1)將毒死蜱結構類似物偶聯溶液與小鼠IgG的碳酸鹽緩沖液溶液混合偶聯獲得毒死蜱結構類似物-IgG偶聯物；2)將所述毒死蜱結構類似物-IgG偶聯物、CdSe/ZnS QDs溶液和硼酸鹽緩沖液混合包覆、透析后獲得熒光探針。

8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述偶聯的溫度為15～25℃，所述偶聯的時間為3～5h。

9.一種檢測毒死蜱的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1～4任意一項所述的側流層析分子印跡試紙條和權利要求5或6所述的熒光探針。

10.一種毒死蜱的檢測方法，包括以下步驟：

將待檢測樣品與權利要求6或7所述的熒光探針滴加至權利要求1～5任意一項所述的側流層析分子印跡試紙條的樣品墊上，2～5min后讀取質控線和檢測線的熒光值，計算檢測線的熒光值和質控線熒光值的比值T/C；

根據以T/C為y軸，以毒死蜱的濃度取Log10的對數值作為x軸制備獲得的標準曲線，計算樣品中毒死蜱的濃度。