[發明專利]一株自然適應體外細胞培養的雞傳染性法氏囊病病毒經典株及其應用有效
| 申請號: | 202010090643.5 | 申請日: | 2020-02-13 |
| 公開(公告)號: | CN111235117B | 公開(公告)日: | 2021-08-27 |
| 發明(設計)人: | 祁小樂;王笑梅;高玉龍;高立;李凱;崔紅玉;劉長軍;潘青;張艷萍 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所(中國動物衛生與流行病學中心哈爾濱分中心) |
| 主分類號: | C12N7/00 | 分類號: | C12N7/00;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139 | 代理人: | 馬鑫 |
| 地址: | 150009 黑龍*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 自然 適應 體外 細胞培養 傳染性 法氏囊病 病毒 經典 及其 應用 | ||
1.一株自然適應體外細胞培養的雞傳染性法氏囊病病毒經典株,命名為IBD17JL01,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址在北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所,保藏編號為CGMCC No.19291,保藏時間為2020年01月08日。
2.權利要求1所述的雞傳染性法氏囊病病毒經典株在制備雞傳染性法氏囊病疫苗中的應用。
3.如權利要求2所述的應用,其特征在于,所述的疫苗為滅活疫苗。
4.一種培養權利要求1所述的雞傳染性法氏囊病病毒經典株的方法,其特征在于,包括以下步驟:
將DF1細胞按1MOI的量接種權利要求1所述的雞傳染性法氏囊病病毒經典株IBD17JL01;接毒后補加含2% v/v胎牛血清的DMEM培養基,繼續置于37℃培養,接毒后60h,將細胞反復凍融三次,收集細胞懸液即為所述的雞傳染性法氏囊病病毒經典株的病毒液。
5.一種雞傳染性法氏囊病滅活疫苗,其特征在于,所述的滅活疫苗中含有滅活后的權利要求1所述的雞傳染性法氏囊病病毒經典株。
6.如權利要求5所述的雞傳染性法氏囊病滅活疫苗,其特征在于,所述的滅活是將權利要求1所述的雞傳染性法氏囊病病毒經典株的生產用毒置冰上使其緩慢融化,加入甲醛溶液至終濃度為0.2% v/v,混勻后,置于37℃滅活48h,期間不斷搖勻,得到滅活后的雞傳染性法氏囊病病毒經典株的病毒液。
7.如權利要求6所述的雞傳染性法氏囊病滅活疫苗,其特征在于,滅活完成后,將滅活后的病毒液與白油佐劑混合后進行乳化,按照體積比計算,白油:病毒液:吐溫=50:25:1,使用乳化器乳化,直到混合物外觀呈乳白色乳劑。
8.如權利要求5所述的雞傳染性法氏囊病滅活疫苗,其特征在于, 所述的滅活苗中,每羽份含抗原量為不低于8×107 PFU。
9.權利要求5-8任一項所述的雞傳染性法氏囊病滅活疫苗在制備預防雞傳染性法氏囊病藥物中的應用。
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