[發(fā)明專利]一種提升梨組培苗大田移栽成活率的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010089834.X
• 申請(qǐng)日: 2020-02-13
• 公開（公告）號(hào): CN111226621A
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳俊;馮鑫慧;李甲明;張紹鈴;朱榮香;泥江萍;張明月;齊開杰;趙渴嬌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01G2/30
• 分類號(hào): A01G2/30;A01G17/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一種利用微嫁接技術(shù)高效提升梨組培苗大田移栽成活率的方法，其特征在于包含以下步驟：

(1)砧木準(zhǔn)備：對(duì)消毒后的梨潔凈種胚進(jìn)行培養(yǎng)，長(zhǎng)至3～5厘米時(shí)選擇單根幼苗作為砧木；

(2)接穗準(zhǔn)備：選擇繼代培養(yǎng)20～30天，帶有2～3片葉子，莖上無(wú)多余分生且葉片舒展的梨組培苗作為接穗；

(3)砧木和接穗處理：砧木處理：將單根砧木幼苗從子葉下方橫切，去除子葉及以上部分，保留根部和部分莖段，然后從其頂端縱向劈開約1厘米；接穗處理：將接穗底端削成楔形，與砧木長(zhǎng)度盡量保持一致；

(4)微嫁接：將接穗插入砧木劈口中，綁縛錫箔紙并用鑷子將四周捏合緊密，將嫁接苗于生根培養(yǎng)基1/2MS+IBA 0.6mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7.0g/L PH＝5.90～5.95中進(jìn)行培養(yǎng)14～16天；

(5)煉苗：選擇生根良好的嫁接苗，無(wú)菌環(huán)境中將錫箔紙摘除，閉瓶煉苗7天；

(6)移栽：將嫁接苗移栽到滅菌的營(yíng)養(yǎng)土中，澆透水并在營(yíng)養(yǎng)缽上方覆蓋保鮮膜，戳適量小洞透氣，置于植物光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，6～9天嫁接苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后摘除保鮮膜繼續(xù)培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的步驟(1)砧木選擇野生梨，優(yōu)選山梨、杜梨和川梨。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于步驟(1)砧木準(zhǔn)備：取消毒后的梨潔凈種胚在MS+30g蔗糖+7.5g瓊脂PH＝5.80～6.0培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)，待種子子葉變綠，胚根開始伸長(zhǎng)，轉(zhuǎn)移至生長(zhǎng)培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L+蔗糖30g+瓊脂7.5g,PH＝5.80～6.0中光下培養(yǎng)，長(zhǎng)至3～5厘米時(shí)選擇單根幼苗作為砧木。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于步驟(1)中梨潔凈種胚通過(guò)以下方法獲得：選擇干凈的野生梨種子，于無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行消毒，消毒方法：75％無(wú)水乙醇消毒1分鐘，10％次氯酸鈉溶液消毒5分鐘，期間反復(fù)震蕩，充分消毒殺菌，每一步消毒處理后用滅菌蒸餾水沖洗3～5次；在滅過(guò)菌的濾紙上，用鑷子按住消毒后的種子，將刀從種子上方垂直插入遠(yuǎn)離胚根的一端，盡量不傷害種胚，后傾斜角度沿種子側(cè)邊劃開種皮，去除內(nèi)外種皮，取出種胚，期間應(yīng)避免傷及胚根。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于(2)接穗準(zhǔn)備：接穗為在MS+6-BA2.0mg/L+IBA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7.5g/L PH＝5.8～6.0的培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)20～30天的梨組培苗，帶有2～3片葉子，莖上無(wú)多余分生且葉片舒展。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(6)：移栽時(shí)用清水將嫁接苗根部殘留的培養(yǎng)基輕輕涮洗干凈，移栽到經(jīng)過(guò)121℃20min高溫高壓滅菌后的營(yíng)養(yǎng)土中，移栽后澆透水并在營(yíng)養(yǎng)缽上方覆蓋保鮮膜，戳適量小洞透氣，置于植物光照培養(yǎng)箱，光照16h；光強(qiáng)2500lx；溫度24℃±1℃中培養(yǎng)，一周左右嫁接苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后摘除保鮮膜繼續(xù)培養(yǎng)。