[發明專利]一種快速檢測血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統及其制備方法

在審

• 申請號: 202010089154.8
• 申請日: 2020-02-12
• 公開（公告）號: CN111273001A
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 潘文東;李道峰
• 申請（專利權）人: 北京大弘生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京漢鼎理利專利代理事務所(特殊普通合伙) 11618
• 代理人: 潘滿根

本發明提供一種快速檢測血液樣本中新冠狀病毒2019?nCoV的系統，所述系統用于檢測新冠狀病毒2019?nCoV的IgM與IgG，其包括扣卡、膠體金免疫層析試紙條和樣本緩沖液；所述膠體金免免疫層析試紙條包括依次連接的樣品墊、全血分離膜、標記墊、層析膜和吸水墊與底板；所述標記墊上同時固定有膠體金?新冠狀病毒N蛋白連接抗原復合物和膠體金?質控分子復合物；所述檢測線上分別固定有鼠抗人IgM?μ鏈抗體和鼠抗人IgG?μ鏈抗體，檢測時，加入待檢測血液樣本到所述樣品墊之后，然后加入所述樣本緩沖液。如果不使用本發明的樣本緩沖液，將樣本直接進行檢測，樣本中的新冠狀病毒IgM與IgG則不能夠被檢測或易出現假陽性，本發明的樣本緩沖液存在對于實現樣本的檢測至關重要。

技術領域

本發明涉及醫學檢驗、免疫診斷系統領域，具體涉及一種快速檢測血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統。

背景技術

冠狀病毒最先是1937年從雞身上分離出來，1965年，Tyrrell與Bynoe 利用胚胎的帶有纖毛的氣管組織首次培養出冠狀病毒，此病毒在電子顯微鏡下可見如日冕般外圍的冠狀，因此被稱為冠狀病毒(Coronaviridae)。冠狀病毒顆粒的直徑60～200nm，平均直徑為100nm，呈球形或橢圓形，具有多形性。冠狀病毒屬的病毒是具外套膜(envelope)的正鏈單股RNA病毒，其遺傳物質是所有RNA，外套膜上存在棘突，整個病毒像日冕，不同的冠狀病毒的棘突有明顯的差異，其中冠狀病毒的一個變種是引起非典型肺炎的病原體，是一種起病急、傳播快、病死率高的傳染病，引起呼吸功能紊亂等，甚至危及生命。冠狀病毒中最大的感染群為人、鼠、豬、貓、犬、狼、雞、牛、禽類脊椎動物。

冠狀病毒(Coronavirus，CoV)屬巢狀病毒目，冠狀病毒科，分為α、β、γ三個屬。α、β屬僅對哺乳動物致病，γ屬主要引起鳥類感染，CoV 主要通過直接接觸分泌物或經氣溶膠、飛沫傳播，也有證據表明可經糞口途徑傳播。到目前為止，引起人類呼吸道疾病的人冠狀病毒(HCoV)已達7種： HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、MERS- CoV和新型冠狀病毒(2019-nCoV)，是人呼吸道感染的重要病原體。

2019新型冠狀病毒，即“2019-nCoV”，新型冠狀病毒是以前從未在人體中發現的冠狀病毒新毒株。臨床表現為發熱、乏力等全身癥狀，伴有干咳，呼吸困難等，可迅速發展為重癥肺炎、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫綜合征，膿毒性休克，多器官功能衰竭，嚴重酸堿代謝紊亂等，甚至危及生命。2020年1月20日，國家衛健委發布2020年1號公告，將新型冠狀病毒感染的肺炎納入《中華人民共和國傳染病防治法》規定的乙類傳染病，并采取甲類傳染病的預防、控制措施。將新型冠狀病毒感染的肺炎納入《中華人民共和國國境衛生檢疫法》規定的檢疫傳染病管理。

新型冠狀病毒(2019-nCoV)是威脅人類健康最嚴重的疾病之一，感染者和病人以中老年人為主，局部地區正面臨著集中發病和死亡的高峰。給人民的財產造成巨大的損失。因此引起國家極為高度的重視。及時篩查并發現感染病人，隔離感染者和接觸者，阻止其進一步傳播仍然是新型冠狀病毒防治的重要手段。

近期，全國的科研人員在新型冠狀病毒(2019-nCoV)感染檢測方面都做了大量的研究工作，并迅速有多家熒光定量PCR檢測試劑和應急上市，但是，PCR熒光定量檢測試劑盒具有操作復雜等特點，很難用于大規模的篩查。

本項目擬開發新冠狀病毒IgM/IgG聯合快速檢測試劑盒(膠體金法)，膠體金免疫層析技術出現于80年代前期，是一種獨特的免疫分析技術，其基本原理是以條狀纖維層析材料為固相，通過毛細作用使樣本溶液在層析條上泳動，同時樣本中的待測物與層析材料上針對待測物的抗原或抗體發生高特異、高親和性免疫反應，層析過程中免疫復合物富集或截留在層析材料的一定區域，通過與之結合的示蹤標志物得到直觀的反應結果。而游離標記物越過檢測條帶，達到與結合標記物自動分離的目的。

發明內容