[發(fā)明專利]一種快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010089154.8
• 申請(qǐng)日: 2020-02-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111273001A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘文東;李道峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大弘生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京漢鼎理利專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11618
• 代理人: 潘滿根

1.一種快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)，其特征在于，所述系統(tǒng)用于檢測(cè)新冠狀病毒2019-nCoV的IgM與IgG，其包括扣卡、膠體金免疫層析試紙條和樣本緩沖液；

所述扣卡為膠體金免疫層析試紙條的外部殼結(jié)構(gòu)，設(shè)有加樣孔和觀察窗；

所述膠體金免免疫層析試紙條包括依次連接的樣品墊、全血分離膜、標(biāo)記墊、層析膜和吸水墊與底板，所述樣品墊、全血分離膜、標(biāo)記墊、層析膜和吸水墊搭載于所述底板之上，所述樣品墊位于所述加樣孔的下方，所述層析膜上固定有兩條檢測(cè)線和一條質(zhì)控線，所述檢測(cè)線和質(zhì)控線位于所述觀察窗的下方，一條檢測(cè)線用于檢測(cè)檢測(cè)新冠狀病毒2019-nCoV的IgM，另一條用于檢測(cè)檢測(cè)新冠狀病毒2019-nCoV的IgG；

所述標(biāo)記墊上同時(shí)固定有膠體金-新型冠狀病毒抗原復(fù)合物和膠體金-質(zhì)控分子復(fù)合物；

所述檢測(cè)線上分別固定有鼠抗人IgM-μ鏈抗體和鼠抗人IgG-μ鏈抗體，標(biāo)記墊上的膠體金-新冠狀病毒抗原復(fù)合物與樣本中的新冠狀病毒IgM和IgG特異性結(jié)合，形成膠體金-新型冠狀病毒抗原-IgM復(fù)合物和膠體金-新型冠狀病毒抗原-IgG復(fù)合物；該復(fù)合物分別與檢測(cè)線上的鼠抗人IgM-μ鏈抗體和鼠抗人IgG-μ鏈抗體特異性結(jié)合；膠體金-質(zhì)控分子復(fù)合物與質(zhì)控線上的特異性抗體結(jié)合，形成膠體金-質(zhì)控分子-抗體復(fù)合物；

檢測(cè)時(shí)，加入待檢測(cè)血液樣本到所述樣品墊之后，然后加入所述樣本緩沖液，所述樣本緩沖液包含牛血清白蛋白組分V、表面活性劑、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)和防腐劑，pH值為6.5-7.5，其中，所述牛血清白蛋白組分V的濃度為0.05～2％，所述表面活性劑濃度為0.05～2％，和所述防腐劑濃度為0.1-1％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)，其特征在于，所述新型冠狀病毒抗原是N蛋白、S蛋白或E蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)，其特征在于，吸附所述質(zhì)控分子的膠體金顆粒大小與吸附新冠狀病毒N蛋白鏈接抗原的膠體金顆粒大小相同，大小范圍為20～70nm，優(yōu)選為38nm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)，其特征在于，所述牛血清白蛋白組分V的濃度為0.1-1％，表面活性劑TritonX-100的濃度為0.1-1％，防腐劑P300的濃度為0.1-0.5％。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)，其特征在于，所述牛血清白蛋白組分V的濃度為0.5％，表面活性劑TritonX-100的濃度為0.1％，防腐劑P300的濃度為0.2％。

6.一種制備權(quán)利要求1-5任一所述的快速檢測(cè)血液樣本中新冠狀病毒2019-nCoV的系統(tǒng)的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

步驟1：分別將新冠狀病毒抗原和質(zhì)控分子吸附在膠體金顆粒表面，分別得到膠體金-新冠狀病毒N蛋白連接抗原復(fù)合物和膠體金-質(zhì)控分子復(fù)合物；

步驟2：將步驟1得到的膠體金-新冠狀病毒抗原復(fù)合物和膠體金-質(zhì)控分子復(fù)合物均固定到標(biāo)記墊上；

步驟3：在所述層析膜上分別設(shè)置一條IgM檢測(cè)線、一條IgG檢測(cè)線和一條質(zhì)控線，其中，質(zhì)控線上固定有能與質(zhì)控分子特異性結(jié)合的生物分子，檢測(cè)線上固定有鼠抗人IgM-μ鏈抗體和鼠抗人IgG-μ鏈抗體；

步驟4：將樣品墊、全血過(guò)濾膜、標(biāo)記墊、層析膜、吸水墊和底板構(gòu)建成膠體金免疫層析試紙條；

步驟5：將膠體金免疫層析試紙條裝卡；和

步驟6：將上述裝條試劑卡、盛有樣本緩沖液的滴瓶封裝，所述樣本緩沖液包含牛血清白蛋白組分V、表面活性劑、磷酸鹽緩沖系統(tǒng)和防腐劑，pH值為6.5-7.5，其中，所述牛血清白蛋白組分V的濃度為0.05～2％，所述表面活性劑濃度為0.05～2％，和所述防腐劑濃度為0.1-1％。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述牛血清白蛋白組分V的濃度為0.1-1％，表面活性劑TritonX-100的濃度為0.1-1％，防腐劑P300的濃度為0.1-0.5％。