[發明專利]BRCA1/2突變檢測組合物、試劑盒及文庫構建方法

有效

• 申請號: 202010086603.3
• 申請日: 2020-02-11
• 公開（公告）號: CN111269980B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 陳明;左中和;郭鑫武;曾敏;李金良;劉讓蛟;戴立忠
• 申請（專利權）人: 圣湘生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11;C40B50/06;C40B40/08
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 任曉;張穎玲

1.一種BRCA1/2基因突變檢測的組合物，所述組合物包括：

如SEQ?ID?NO:1~92所示的寡核苷酸，其中，SEQ?ID?NO:1~46所示的寡核苷酸用于檢測BRCA2基因，SEQ?ID?NO:47~92所示的寡核苷酸用于檢測BRCA1基因。

2.根據權利要求1所述的組合物，其中，進一步包括根據測序接頭設計的引物對。

3.使用如權利要求1或2所述的組合物在制備BRCA1/2基因突變檢測的試劑盒中的用途。

4.一種BRCA1/2基因突變檢測的試劑盒，包括：如權利要求1或2所述的組合物。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其中，進一步包括片段化所需試劑。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其中，所述片段化所需試劑為DNA片段化酶。

7.根據權利要求4所述的試劑盒，其中，進一步包括選擇片段試劑。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其中，所述選擇片段試劑為磁珠。

9.一種BRCA1/2基因文庫的構建方法，所述方法包括：

1）使用權利要求1或2所述的組合物擴增樣品中的BRCA1/2基因，得到擴增子；

2）將所述擴增子片段化；

3）選擇片段，并進行末端修復和加腺苷酸；

4）連接接頭；以及

5）第二輪PCR擴增。

10.根據權利要求9所述的方法，其中，步驟2）中所述片段化為化學片段化或物理片段化。

11.根據權利要求9或10所述的方法，在步驟2）中將所述文庫片段化為主峰在300bp，范圍在200~400bp的片段。

12.根據權利要求9所述的方法，步驟3）中的選擇片段通過調整磁珠液的用量進行。

13.根據權利要求9~12中任一項所述的方法獲得的BRCA基因文庫。