[發(fā)明專利]BRCA1/2突變檢測組合物、試劑盒及文庫構(gòu)建方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010086603.3 | 申請日： | 2020-02-11 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111269980B | 公開（公告）日： | 2023-06-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳明;左中和;郭鑫武;曾敏;李金良;劉讓蛟;戴立忠 | 申請（專利權(quán)）人： | 圣湘生物科技股份有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6886 | 分類號(hào)： | C12Q1/6886;C12N15/11;C40B50/06;C40B40/08 |
| 代理公司： | 北京派特恩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270 | 代理人： | 任曉;張穎玲 |
| 地址： | 410205 湖南省長沙*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | brca1 突變 檢測 組合 試劑盒 文庫 構(gòu)建 方法 | ||
1.一種BRCA1/2基因突變檢測的組合物，所述組合物包括：
如SEQ?ID?NO:1~92所示的寡核苷酸，其中，SEQ?ID?NO:1~46所示的寡核苷酸用于檢測BRCA2基因，SEQ?ID?NO:47~92所示的寡核苷酸用于檢測BRCA1基因。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，進(jìn)一步包括根據(jù)測序接頭設(shè)計(jì)的引物對。
3.使用如權(quán)利要求1或2所述的組合物在制備BRCA1/2基因突變檢測的試劑盒中的用途。
4.一種BRCA1/2基因突變檢測的試劑盒，包括：如權(quán)利要求1或2所述的組合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其中，進(jìn)一步包括片段化所需試劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其中，所述片段化所需試劑為DNA片段化酶。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其中，進(jìn)一步包括選擇片段試劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其中，所述選擇片段試劑為磁珠。
9.一種BRCA1/2基因文庫的構(gòu)建方法，所述方法包括：
1）使用權(quán)利要求1或2所述的組合物擴(kuò)增樣品中的BRCA1/2基因，得到擴(kuò)增子；
2）將所述擴(kuò)增子片段化；
3）選擇片段，并進(jìn)行末端修復(fù)和加腺苷酸；
4）連接接頭；以及
5）第二輪PCR擴(kuò)增。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中，步驟2）中所述片段化為化學(xué)片段化或物理片段化。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的方法，在步驟2）中將所述文庫片段化為主峰在300bp，范圍在200~400bp的片段。
12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，步驟3）中的選擇片段通過調(diào)整磁珠液的用量進(jìn)行。
13.根據(jù)權(quán)利要求9~12中任一項(xiàng)所述的方法獲得的BRCA基因文庫。
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