[發明專利]一種快速檢測茶葉中苦參堿殘留量的方法

有效

• 申請號: 202010082172.3
• 申請日: 2020-02-07
• 公開（公告）號: CN111189941B
• 公開（公告）日: 2022-08-05
• 發明（設計）人: 張迎;俞安敏;馮穎;劉平年;陳志強
• 申請（專利權）人: 通標標準技術服務（上海）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上海科政專利代理事務所(普通合伙) 31463
• 代理人: 楊軍

1.一種快速檢測茶葉中苦參堿殘留量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)樣品預處理：將茶葉樣品用粉碎機粉碎后過2.0mm篩，混合均勻，裝入潔凈干燥的自封袋中，密封備用；

2)樣品的提取：稱取樣品，用氨水和乙腈提取；

3)樣品的凈化：將步驟2)所得的提取液過FaPEx-TEA凈化柱后，采用氨水-乙腈溶液稀釋，混勻；

4)基質標準溶液制備：稱取不含苦參堿的陰性樣品，根據步驟1)至步驟3)制備陰性樣品提取液，用于配制苦參堿基質標準溶液；

5)采用液相色譜-串聯質譜儀測定樣品溶液中苦參堿的濃度；

6)根據步驟5)所得的樣品溶液中苦參堿的濃度，經由步驟4)得到的基質標準溶液校正，即可計算樣品中苦參堿的殘留量；

步驟2)中，稱取均勻試樣0.5g，置于50mL離心管中，加入2mL氨水，渦旋均勻，靜置10min，再加入18mL乙腈，渦旋均勻，然后以6000r/min離心8min，取上清液過0.45μm濾膜于50mL離心管中；

步驟3)中，取2mL上清液分兩次通過FaPEx-TEA凈化柱，收集凈化液，取500μL凈化液，加入氨水-乙腈溶液稀釋定容到1mL，混勻后供液相色譜-串聯質譜儀分析；

步驟3)中，所述氨水-乙腈溶液以氨水/乙腈v/v＝1∶9；

步驟5)中，所述液相色譜-串聯質譜儀的測定條件為：

1)液相色譜柱采用C18柱，規格為柱長10cm，柱內徑3.0mm，粒徑3.5μm；

2)液相色譜柱溫度設定為25℃；

3)進樣量：50μL；

4)流速：0.3mL/min；

5)流動相條件見下表：

6)運行時間：15min

7)質譜參數見下表：

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟4)中，若樣品為陽性，按照步驟1)、2)、3)制備陰性樣品提取液，再根據樣品中苦參堿殘留物的濃度，移取適量的苦參堿標準中間溶液，用陰性樣品提取液配制成等同濃度的基質標準溶液進行液相色譜-串聯質譜分析，用于計算樣品中苦參堿的實際殘留量。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟5)中，由凈化溶液中苦參堿的濃度換算到樣品溶液中苦參堿的含量，根據基質標準溶液進行基質效應的校準，采用外標法定量，最低定量濃度為0.01mg/kg。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟6)中，通過比較樣品峰和標準品峰的保留時間、特征離子對及離子對豐度比，確定樣品中是否檢出苦參堿，再使用基質標準溶液對基質效應進行校正，采用外標法定量。