[發明專利]一種用于檢測非洲豬瘟病毒DNA的組合物及試劑盒

在審

• 申請號: 202010081958.3
• 申請日: 2020-02-06
• 公開（公告）號: CN111254220A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 廖東升;趙偉;鞠青;邱坤
• 申請（專利權）人: 成都導勝生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 成都中絡智合知識產權代理有限公司 51300
• 代理人: 喻依豐

1.一種用于檢測非洲豬瘟病毒DNA的組合物，其特征在于：包含A組或者包含A組在內的多組引物對和探針；

所述A組由引物對引物-F：SEQ ID NO：1，引物-R：SEQ ID NO：2和探針：SEQ ID NO：9組成；

另一組B由引物對引物-F：SEQ ID NO：3，引物-R：SEQ ID NO：4和探針：SEQ ID NO：10組成；還包括

另一組C由引物對引物-F：SEQ ID NO：5，引物-R：SEQ ID NO：6和探針C：SEQ ID NO：11組成；還包括

另一組D由引物對引物-F：SEQ ID NO：7，引物-R：SEQ ID NO：8和探針D：SEQ ID NO：12組成。

2.根據權利1所述的一種用于檢測非洲豬瘟病毒DNA的組合物，其特征在于：所述探針A、探針B和探針C均包含熒光分子5’端的熒光基團和3’端的淬滅基團，所述5’端采用FAM、HEX、CY3、CY5、VIC、ROX中任一一種，所述3’端對應的采用BHQ1、BHQ2、Dabcyl、TAMRA、eclipse中任一一種。

3.根據權利1所述的一種用于檢測非洲豬瘟病毒DNA的組合物，其特征在于：還包括內標，內標引物-F：SEQ ID NO：13；內標引物-R：SEQ ID NO：14；內標探針：SEQ ID NO：15，其中內標探針含熒光分子5’端的熒光基團為VIC，3’端的淬滅基團為Bhq1。

4.一種試劑盒，其特征在于：包含權利要求1-3中任一項所述的一種用于檢測非洲豬瘟病毒DNA的組合物。

5.根據權利4所述的一種試劑盒，其特征在于：還包括擴增反應體系，具體由5ul的10XPCRmix溶液、4ul濃度為10mmol/l的dNTP mix溶液、1ul濃度為5U/mL的UNG酶、1ul2.5U/mL的TaqDNA聚合酶、濃度均為10umol/l的引物F和引物R各1ul，以及1ul的探針，1-5ul的模板和31-35ul的水組成50ul的擴增反應體系。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：所述10X PCRmix溶液具體由500mmol/l的KCl、100mmol/l且PH＝9.0的TRIS-HCl和1％Triton-X組成。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于：所述dNTP mix溶液具體由7.5mmol/l的dUTP、2.5mM/L的dTTP、10mM/L的dATP、dGTP和dCTP組成。

8.根據權利要求4-7任一項所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒在用于非洲豬瘟病毒檢測中的應用。