[發明專利]一種同時檢測血液樣品中多種水溶性維生素的方法及其應用

有效

• 申請號: 202010074354.6
• 申請日: 2020-04-01
• 公開（公告）號: CN111175406B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 張召;刁嘉茵;雷春燕;肖妮;陳濤
• 申請（專利權）人: 廣東南芯醫療科技有限公司;廣東一元蘭欣生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/88
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

1.一種血液水溶性維生素的檢測方法，其特征在于，采用液質聯用方法進行檢測，包括以下步驟：

一.溶液的制備

供試品溶液制備：取血液樣品加入到甲醇、乙腈溶液中，混勻離心，取上清后再加入水：甲醇，得供試品溶液；

標準品溶液的制備：將各標準品用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成標準品母液，將各標準品母液用乙腈/甲醇進行稀釋至同一容量瓶中，得到系列不同濃度的混合標準品溶液；

內標溶液制備：將各內標用甲酸和甲醇/水溶液溶解配制成內標標準品母液，將各內標標準品母液用乙腈/甲醇進行稀釋至同一容量瓶中，得到系列不同濃度的混內標溶液；

二.測定

將上述制備的供試品溶液、標準品和內標溶液進行LC-MS測定；

色譜柱為WATERS?ACQUITY?UPLC色譜柱：2.1?mm×100?mm，1.7μm；

其中洗脫采用梯度方式洗脫，流動相A為10mM乙酸銨和0.01%甲酸混合的水溶液，流動相B為0.01%甲酸和10mM乙酸銨混合的乙腈溶液；

梯度洗脫程序為：0-1.5?min?98%?B，1.5-2.5?min?98%-85%?B，2.5-6?min?85%-50%?B，6-7.5?min?50%-25%?B，7.5-7.51?min?25%-98%?B，7.51-10?min?98%?B；

MS檢測過程中組分測量參數如下所示：

。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述血液樣品為血液中血漿或血清樣品。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述供試品溶液制備的操作為：取樣品200～300μL，加入甲醇：乙腈溶液800～900μL，混勻，離心，取上清氮氣吹干后加入甲醇溶液得供試品溶液。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，MS檢測的條件為：

電噴霧離子源ESI源；采用正離子掃描模式；霧化氣流量：3?L/min；加熱氣流量:10?L/min；接口溫度：300℃；加熱塊溫度：400℃；DL溫度：250℃；干燥氣流量：10?L/min。

5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：柱溫為35～40℃。

6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述柱溫為35℃。