[發(fā)明專利]一種檢測IL-6的試劑盒及檢測IL-6的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010069721.3
• 申請日: 2020-01-21
• 公開（公告）號: CN111239414B
• 公開（公告）日: 2023-09-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李倩;徐祎春;歐瑩;趙英楠
• 申請（專利權(quán)）人: 上海生物芯片有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577
• 代理公司: 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 鄭權(quán)

本發(fā)明公開一種檢測IL?6的免疫熒光試劑盒，包被有捕獲抗體的羧基磁珠、生物素化的IL?6檢測抗體、親和素偶聯(lián)的β?半乳糖苷酶、酶反應(yīng)發(fā)光底物、已知濃度的IL?6標(biāo)準(zhǔn)品、用于配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液、質(zhì)控品溶液、樣品溶液的稀釋液。本發(fā)明還提供其制備方法及檢測IL?6的方法。本發(fā)明提供的試劑盒具有所需樣本體積小、檢測結(jié)果準(zhǔn)確、檢測靈敏度高、特異性好、線性范圍寬、重復(fù)性好、檢測時間短、并方便用于全自動檢測儀器等優(yōu)點，克服了現(xiàn)有免疫檢測技術(shù)中存在的很多缺點。易于大范圍推廣應(yīng)用，具有廣闊的市場前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種檢測IL-6的試劑盒、其制備方法及檢測IL-6的方法。

背景技術(shù)

白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)，屬于白細(xì)胞介素的一種，由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及內(nèi)分泌組織如垂體、甲狀腺等多種細(xì)胞分泌，可以促進(jìn)肝臟合成急性期蛋白，激活T淋巴細(xì)胞，并誘導(dǎo)B細(xì)胞的終末期分化，使之成為具有分泌免疫球蛋白的免疫活性細(xì)胞。

作為一種多效能細(xì)胞因子，IL-6與可溶性IL-6受體形成IL-6/IL-6R復(fù)合物，活化細(xì)胞膜表面的gpl30，誘導(dǎo)信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子3活化，即IL-6信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。IL-6在宿主防疫機(jī)制中發(fā)揮重要作用，在正常生理狀態(tài)時，IL-6的表達(dá)水平比較低，但是在創(chuàng)傷、炎癥、腫瘤等各種病理情況下，IL-6的表達(dá)明顯升高。IL-6的升高可能對機(jī)體產(chǎn)生不利影響，造成組織損害和加重病情發(fā)展。目前IL-6主要在以下研究方面具有重要意義：

1、炎癥反應(yīng)

感染、創(chuàng)傷、大手術(shù)等因素可誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)，嚴(yán)重時可發(fā)展為多器官功能障礙綜合征(MODS)，甚至死亡。國內(nèi)外有學(xué)者報道，IL-6濃度的高低預(yù)示著SIRS患者病程的進(jìn)展，并可以作為SIRS患者預(yù)后的一個預(yù)測因素。

過度的炎癥可以導(dǎo)致斑塊形成，冠脈粥樣硬化斑塊局部和粥樣硬化損傷的動脈壁上均有IL-6的表達(dá)，且表達(dá)量是正常組織的10-40倍；IL-6在動脈粥樣硬化壁中的濃度為其血清的200倍，并可以反映隱藏的斑塊炎癥和破裂可能性的大小。

作為感染性疾病新的標(biāo)志物，IL-6測定還可用于感染性疾病的預(yù)后判斷，動態(tài)觀察IL-6水平有助于了解感染性疾病的進(jìn)展和患者對治療的反應(yīng)。

2、腫瘤免疫

IL-6與多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，并與其診斷和預(yù)后相關(guān)聯(lián)。它通過干預(yù)細(xì)胞的粘附性和活動力、血栓形成、腫瘤特異性抗原的表達(dá)及腫瘤細(xì)胞的增殖，從而影響腫瘤的進(jìn)展。研究表明，IL-6對膽管癌、肝細(xì)胞癌、鼻咽癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等腫瘤疾病的預(yù)后具有重要意義。

3、心血管疾病

IL-6參與了冠狀動脈粥樣硬化的形成，是冠脈事件的預(yù)測因子，與心力衰竭的進(jìn)展相關(guān)。此為，IL-6與心臟粘液瘤和不穩(wěn)定型心絞痛、腦梗死等心血管疾病也有一定的關(guān)系。

目前臨床上對IL-6的檢測方法主要有放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)、化學(xué)發(fā)光法(CLIA)等。放射免疫法存在有效期短、放射性污染的缺點。ELISA方法通常只適用手工操作，不利于高通量的全自動檢測儀器的檢測，加大了實驗結(jié)果人為因素引起的誤差。并且ELISA方法檢測靈敏度較低(通常只能達(dá)到pg/mL的靈敏度水平)，線性范圍窄。CLIA方法需要特定的化學(xué)發(fā)光儀器，并且對實驗操作人員的要求相對較高。

因此，提供一種分析靈敏度更高、線性范圍更寬、操作簡單便捷的檢測IL-6的試劑盒具有重要的現(xiàn)實意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于，提供一種檢測IL-6的試劑盒，其具有靈敏度高的優(yōu)點。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：