[發明專利]一種綿羊精液常溫保存的稀釋液的制備方法在審
| 申請號: | 202010068814.4 | 申請日: | 2020-01-21 |
| 公開(公告)號: | CN111226907A | 公開(公告)日: | 2020-06-05 |
| 發明(設計)人: | 李擁軍;張柳明;馮云奎;馬金亮;王健 | 申請(專利權)人: | 揚州大學 |
| 主分類號: | A01N1/02 | 分類號: | A01N1/02 |
| 代理公司: | 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222 | 代理人: | 沈志海 |
| 地址: | 225009 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 綿羊 精液 常溫 保存 稀釋液 制備 方法 | ||
1.一種綿羊精液常溫保存的稀釋液的制備方法,其特征是,包括以下步驟:
步驟1)、將30.2~31.2gTris、15.9~16.9g檸檬酸、19.5~20.5g果糖、0.3~0.4g青霉素鈉、0.6~0.7g鏈霉素硫酸鹽溶解于1000mL滅菌的超純水中,得到基礎稀釋液;
步驟2)、當取95mL經步驟1)配制的基礎稀釋液,向95mL基礎稀釋液中添加5mL的卵黃,得到第一稀釋液,然后將第一稀釋液放入冰箱使其充分溶解,然后10000r/min、4℃條件下離心20min,離心后取出上清液,即得到卵黃濃度為5%的卵黃稀釋液;
當取85mL經步驟1)配制的基礎稀釋液,向85mL基礎稀釋液中添加15mL的卵黃,得到第二稀釋液,然后將第二稀釋液放入冰箱使其充分溶解,然后10000r/min、4℃條件下離心20min,離心后取出上清液,即得到卵黃濃度為15%的卵黃稀釋液;
當取80mL經步驟1)配制的基礎稀釋液,向80mL基礎稀釋液中添加20mL的卵黃,得到第三稀釋液,然后將第三稀釋液放入冰箱使其充分溶解,然后10000r/min、4℃條件下離心20min,離心后取出上清液,即得到卵黃濃度為20%的卵黃稀釋液;
卵黃濃度為5%的卵黃稀釋液、卵黃濃度為15%的卵黃稀釋液、卵黃濃度為20%的卵黃稀釋液均為綿羊精液常溫保存的稀釋液。
2.根據權利要求1所述的一種綿羊精液常溫保存的稀釋液的制備方法,其特征是,步驟1)中,首先將30.2~31.2gTris、15.9~16.9g檸檬酸、19.5~20.5g果糖、0.3~0.4g青霉素鈉、0.6~0.7g鏈霉素硫酸鹽充分溶解于1000mL滅菌的超純水中,然后使用0.22μm濾膜進行過濾除菌,過濾除菌后添加0.3~0.4g青霉素鈉、0.6~0.7g鏈霉素硫酸鹽,使其充分溶解,得到基礎稀釋液。
3.根據權利要求1所述的一種綿羊精液常溫保存的稀釋液的制備方法,其特征是,步驟1)中基礎稀釋液由30.7gTris、16.4g檸檬酸、20g果糖、0.3118g青霉素鈉、0.6944g鏈霉素硫酸鹽溶解于1000mL滅菌超純水構成。
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